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肠道杆菌:寄生于肠道的一大群生物学性状相似的G-中等大小杆菌的总称。多数正常菌群部分条件致病菌少数致病菌肠道杆菌2.培养:兼性厌氧,普通琼脂平板培养,肠道SS培养基(选择培养基)分离培养,结果:肠道非致病菌:红色大菌落,肠道致病菌:无色透明小菌落。肠道杆菌的共同特征:1.形态特征:G-中等大小的杆菌,无芽胞,2.多数有周鞭毛及菌毛。基础培养基,乳糖(底物),胆盐、煌绿(抑制非致病菌),中性红(指示剂)。SS培养基:沙门菌属(Salmonella)志贺菌属(Shigella)SS平板(鉴别/选择培养基)肠道非致病菌乳糖(⊕)肠道致病菌乳糖(-)3.生化反应:活泼,分解多种糖类、蛋白质。乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌与非致病菌。代表种动力葡萄糖乳糖靛基质H2S尿素酶埃希菌属大肠埃希菌++++--志贺菌属痢疾志贺菌-+-+/---沙门菌属伤寒沙门菌++---/+-变形杆菌属变形杆菌++-+++四类肠道杆菌的生化反应:菌体抗原(O-Ag)鞭毛抗原(H-Ag)毒力抗原(Vi-Ag、K-Ag)5.抵抗力:弱。胆盐和煌绿对非致病性肠道杆菌有选择性抑制作用。4.抗原构造6.变异:耐药性变异。维生素(营养)细菌素(拮抗)条件免疫力寄居部位改变第1节埃希菌属(Escherichia)大肠埃希菌(大肠杆菌,E.coli)2.特殊菌株:腹泻。1.正常菌群:人类出生不久进入肠道,并延续终身,合成条件致病菌肠外感染。一、生物学特性1.形态染色:G-中等大小杆菌,周鞭毛及普通菌毛2.和性菌毛。2.培养特性:SS培养基上形成红色大菌落。3.生化特点:葡萄糖+、乳糖+,动力+,H2S-O抗原:>170种4.抗原构造H抗原:>56种K抗原:>100种血清型表示方式:O:k:H如:O111:k58:H2二、致病性(一)致病物质1.黏附素:定植因子抗原Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ2.外毒素志贺毒素耐热肠毒素(ST)不耐热肠毒素(LT)3.其他致病物质内毒素荚膜载铁蛋白Ⅲ型分泌系统:LTST对热稳定性不耐热耐热65ºC×30min灭活耐100ºC×20min亚单位A、Ba、b黏膜受体GM1神经节苷脂不清致泻机理活化腺苷酸环化酶活化鸟苷酸环化酶ATPcAMPGTPcGMPB亚单位与肠黏膜上皮细胞膜表面GM1神经节苷脂结合,A亚单位穿过细胞膜激活腺苷酸环化酶,使ATPcAMP肠液分泌致泻。Ⅲ型分泌系统:犹如分子注射器,是指细菌接触宿主细胞后,能向宿主细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统,约由20余种蛋白组成。1.肠外感染(条件致病菌):(二)所致疾病寄居部位改变肠外感染化脓性感染泌尿道感染肠内正常菌群腹膜炎阑尾炎败血症新生儿脑膜炎尿道炎膀胱炎肾盂肾炎ETEC:婴幼儿、旅游者腹泻EIEC:大儿童、成人腹泻EPEC:婴儿腹泻EHEC:O157:H72.肠内感染(某些血清型):胃肠炎(腹痛、腹泻、恶心、呕吐)外源性大肠杆菌污染的食物、饮水三、卫生细菌学检查大肠菌群数:作为饮水、食品等粪便污染的指标之一。我国卫生标准规定:每1000ml饮水<3个每100ml瓶装汽水、果汁<5个大肠菌群细菌总数每ml样品<100个第3节沙门菌属(Salmonella)沙门菌属:血清型>2500余种甲型付伤寒沙门菌肖氏沙门菌希氏沙门菌伤寒沙门菌付伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌肠炎沙门菌猪霍乱沙门菌等。常见致病性沙门菌:一、生物学性状1.形态染色:G-,有菌毛及周鞭毛。2.培养特性:SS培养基:无色透明小菌落。3.生化反应:葡乳尿靛H2S动力伤寒沙门菌+----/++甲型副伤寒沙门菌----/++乙型副伤寒沙门菌---++++4.抗原结构:O抗原/菌体抗原(脂多糖):耐热100ºC×1h,数种沙门菌共有,产生IgM型抗体。H抗原/鞭毛抗原(蛋白质):不耐热60ºC×30min灭活,具特异性,产生IgG型抗体。Vi抗原/毒力抗原:抗原性弱,Vi抗体可用于检测带菌者。二、致病性与免疫性(一)致病物质1.侵袭力菌毛Ⅲ型分泌系统侵袭蛋白Vi抗原2.内毒素:白细胞下降3.外毒素:肠毒素(某些菌株产生)沙门菌粪口途径肠壁、肠系膜淋巴结血(第1W:第1次菌血症)全身各脏器(肝、脾、肾、胆囊等)血(第2W:第2次菌血症)肠壁再次侵入肠壁淋巴组织随粪便排出体外肠壁坏死、溃疡、出血(第2~3W:Ⅳ型超敏反应)病情开始好转(3~4W后)(二)所致疾病1.肠热症(伤寒、副伤寒)并发症:肠出血、肠穿孔2.食物中毒:最常见的沙门菌感染:鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。3.败血症:鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌感染。4.无症状带菌者:1~5%。(三)免疫性胞内寄生菌,细胞免疫,一定程度免疫力。三、微生物学检查(一)病原菌的分离与鉴定1.标本采取:2.步骤:1W血发病第2W粪便或尿全程骨髓粪便、尿SS培养基无色可疑菌落血、骨髓肉汤培养基双糖铁培养基(增菌)生化反应玻片凝集反应(二)血清学诊断:肥达试验(Widaltest)概念:用已知伤寒杆菌O、H抗原和甲副、肖氏、希氏伤寒杆菌H抗原与病人血清作试管凝集试验,检查患者血清中有无相应抗体及其效价。原理:试管凝集试验诊断菌液未知抗体定性、定量实验方法:1:201:801:3201:12801:401:1601:640阴对伤寒O-Ag伤寒H-Ag甲副H-Ag乙副H-AgTOPBPATH正常抗体水平:当TO≥1:80TH≥1:160有诊断意义PA、PB≥1:80动态观察:逐周复查,抗体效价逐次递增≥4倍有诊断价值。判定结果时要考虑因素:OH抗体型:IgMIgG出现时间:早晚消失时间:快慢特异性:弱强O、H均高:伤寒、副伤寒可能性大O、H均低:伤寒、副伤寒可能性小H高、O不高:预防接种或非特异性回忆反应O高、H不高:感染早期或其它沙门菌引起的交叉反应O与H抗体的诊断意义:Widaltest1.简述肠道杆菌的共同生物学特性。2.分析大肠杆菌的致病性。3.设计一个肠道杆菌分离培养和鉴定程序。习题
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