尿发展4

尿干化学分析技术进展和展望•干化学技术的发展简史•(1)国外尿液干化学分析技术发展概况•1941年Bayer公司的WalterCompton设计出基于班氏法的干化学尿糖试剂片Clinitest，省却了原来的加热程序。以及后来出现的尿酮体试剂片Acetest、潜血试剂片Ocultest，和胆红素试剂片Ictotest•1956年：联合尿糖、蛋白、pH等多个项目组合的多联试纸问世，从3~4个项目组合到九十年代的尿液10项干化学试带•1970年起，用于判读尿试带颜色变化的半自动化仪器问世，在美国、德国和日本，此类仪器发展非常迅速，多为配合自己所生产的干化学试带而产出的设备•1980年:具有自动进样，点滴，试带传输和打印功能的全自动尿干化学分析仪问世•中国的尿液干化学分析试纸和仪器发展概况•1966年：北京协和医院检验科生产出12种用于测定尿液中化学成分的试纸，开创了我国干化学试纸分析的先驱时代，并有文章发表，因为当时正处于文革初期，因此所发表的论文带有一定的文革色彩。当年所开发的试纸中就包括目前应用广泛的尿蛋白、尿糖、酮体、胆红素、pH、潜血等项目，并有相应的论文发表(图)•1980年，北京协和医院与美国Miles的Ames公司签订双方协作计划，首次从美国引进一批自动化和半自动化检验设备，这在当时国内许多检验都处于手工测定时代，是非常先进的设备。其中就包括8项尿液化学成分分析的半自动和全自动尿液干化学分析仪(图)。可以说这是国内第一次使用尿液干化学仪器•1985年：改革开放以后的这个年代前后，国内不少厂家如北京化工厂、桂林医疗电子仪器厂、苏州第一医药公司等引进日本京都第一化学或日本荣研化学的生产技术，生产8项的干化学试带生产线，然后还引进了著名的MA-4210型号的尿液分析仪(图)•1990年代：国内生产尿液干化学试带和仪器的厂家逐渐增多，并有多种引进型号的仪器进入中国市场，如日本、美国、德国和韩国的仪器为主(图)，这些型号的仪器在各大医院均担负主要的尿液分析工作。而此阶段国产仪器也大量问世，其代表性品牌如迪瑞和优利特，已经广为熟知，其生产的尿仪和试纸也占据国内大量用户市场。尿液干化学分析仪器和试带已经扩展为10项至11项••尿干化学分析技术•干化学试纸•所谓尿分析的干化学技术，即是将尿中的被检成分与试剂的化学反应，均在试纸上完成，不需要任何外界添加试剂、加热、洗涤等繁杂操作，以试纸块上化学反应后所呈现的颜色变化来判别某物质的有无及大致含量。这种干化学分析法所用试剂被称为尿试纸或尿试带，有单项，2项，4项和多联试纸之分，目前在医院临床应用中最多的是10项或11项多联试纸。•尿试带是许多含有各种化学试剂成分的试剂垫附着在塑料条上构成，许多试纸为单层结构。这些试剂垫的质量是决定尿液化学反应的关键，他一般采用高质量的滤纸，经配置的化学试剂浸泡，然后干燥，剪裁成块状后再按一定顺序和间隔粘贴到塑料条上而制成，当然整个生产工艺非常复杂，生产条件严格，且需要各种专用自动化设备和质量保障体系参与生产的全过程。•尿干化学法测定原理•尿液酸碱度(pH)原理：采用酸碱指示剂法。尿中pH可使该测定区中的甲基红和溴麝香草酚篮两种指示剂发生颜色改变，可表达pH5.0~9.0的变色范围•尿比密(SpecificGravity，SG)•原理：采用多聚电解质离子解离法。预先处理的高分子电解质与尿中各种离子浓度的关系导致的电离常数的负对数(pKa)的变化。尿中含有以NaCl为主的电解质，在水中解离为Na+和Cl-，可和离子交换体中的氢离子置换，在水溶液中放出氢离子(H+)。随着尿液中不断增加的氢离子浓度，使得指示剂溴麝香草酚蓝的颜色发生改变•尿蛋白(Protien，PRO)原理：采用“指示剂蛋白质误差”(Proteinerrorofindicators)原理。尿中存在蛋白质时，由于蛋白质离子对带相反电荷指示剂离子吸引而造成溶液中指示剂进一步电离，在不同的pH值时，可使指示剂改变颜色•尿葡萄糖(Glucose，GLU)•原理：采用葡萄糖过氧化物酶法。尿中葡萄糖在试纸上的葡萄糖氧化酶催化下，生成葡萄糖酸内酯和过氧化氢，试纸上的过氧化物酶进一步将过氧化氢分解为水并放出新生态氧，可使试纸条上的色原指示剂改变颜色•尿酮体(Ketonebodies，KET)•原理：采用亚硝基铁氰化钠法。尿中的丙酮或乙酰乙酸与试纸上的亚硝基铁氰化钠反应，产生浅紫色到深紫色变化。•尿胆红素(Bilirubin,BIL)•原理：以偶氮反应为基本原理。在强酸介质中胆红素与重氮盐发生耦联反应，生成红色偶氮化合•尿胆原(Urobilinogen，UBG)•原理：采用醛反应法或重氮反应法为原理。在强酸性条件下，尿胆原与试纸中二氯苯胺重氮盐产生偶联反应，生成樱红色缩合物，试剂模块发生黄色到红色的改变•尿亚硝酸盐(Nitrite，NIT)•原理：采用亚硝酸盐还原法。尿中含有的亚硝酸盐在酸性环境中先与对氨基苯磺酸反应形成重氮盐，再与α-萘胺结合而产生粉红色偶氮化合物•红细胞(潜血)•原理：采用红细胞类过氧化物酶法。血红蛋白中的亚铁血红素具有过氧化物酶样作用，可以催化过氧化氢放出新生态氧，进一步氧化指示剂而产生颜色变化•白细胞(酯酶)•原理：采用粒细胞酯酶(leukocyteesterase)法。中性粒细胞特异性地含有一种酯酶，而这种酯酶在红细胞、淋巴细胞、血小板、血清、肾脏及尿液中均不存在。试纸反应基质是吲哚酚羟基酸酯，在酯酶作用下将其转变为吲哚酚，再与重氮盐发生反应形成紫色缩合•进展从干化学试带上看，进展有限，项目保持在10~11项，已经有20余年的历史。最近有些产品新增加了尿微量白蛋白检测，使得尿中微量白蛋白测定的敏感性有所提高，例如Bayer公司新生产的尿10项MultistixPro试带，在蛋白检测中使用了两个试剂块，一个用于高浓度蛋白测定，另一个用于低浓度蛋白检测，这对早期糖尿病肾病的筛查和治疗具有一定价值执行行业标准•国家食品药品管理局医疗器械标准管理中心，全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会与国内相关专业的专家组成员共同制定了《尿液分析试纸条》和《干化学尿液分析仪》两个中华人民共和国医药行业标准