9微生物检验质量控制

微生物检验的质量控制温州医学院检验医学院温州医学院附属第一医院周铁丽微生物检验的质量控制质量控制（Qualitycontrol）是临床微生物学实验室为了保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。室内质量控制室内质量控制是由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础。室间质量控制评价室间质量控制评价是由实验室外部的组织或机构对实验室进行的质量评价。检验前的质量保证检验前程序：又叫分析前期。指从临床医生开医嘱开始，到分析检验程序启动时终止的步骤。包括检验申请标本的采集、运送与接收微生物检验中的质量保证•人员的组织与管理•规范的操作规程•试剂•培养基•设备•检验过程试剂、培养基的质量控制有效期外观性能测试保存各种试剂的监控菌种试剂“x+v”因子试剂条流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌嗜沫嗜血杆菌硝酸盐还原试剂大肠埃希菌醋酸钙不动杆菌每批，以后每次靛基质试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每天甲基红试剂大肠埃希菌产气肠杆菌每批，以后每周V-P试剂产气肠杆菌大肠埃希菌每批，以后每周常用试验、染液的推荐菌株试验名称阳性对照菌阴性对照菌血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌触酶试验金黄色葡萄球菌肺炎链球菌氧化酶试验铜绿假单胞菌大肠埃希菌杆菌肽试验A群链球菌B群链球菌奥普托欣试验肺炎链球菌草绿色链球菌革兰染液金黄色葡萄球菌大肠埃希菌抗酸染液结核分枝杆菌混合非抗酸菌测定各种培养基性能的菌种培养基质控菌株判定标准羊血琼脂平板金黄色葡萄球菌ATCC25923生长生长试验大肠埃希菌ATCC25922生长溶血反应肺炎链球菌ATCC19615生长，α溶血化脓性链球菌ATCC6305生长，β溶血杆菌肽敏感（纸片法）化脓性链球菌ATCC630510mm，敏感B群链球菌10mm，耐药Optochin敏感（纸片法）肺炎链球菌15∽18mm，敏感涎链球菌15mm，耐药测定各种培养基性能的菌种巧克平板生长试验淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌肺炎链球菌生长SS平板鼠伤寒沙门菌伤寒沙门菌福志贺菌大肠埃希菌肠球菌生长，黑色菌落中心生长，无色透明菌落生长，无色透明菌落部分抑制生长，红色混浊菌落部分抑制生长测定各种培养基性能的菌种麦康凯平板大肠埃希菌生长，红色混浊菌落伤寒沙门菌生长，无色透明菌落中国蓝琼脂大肠埃希菌生长，蓝色菌落伤寒沙门菌生长，无色菌落营养琼脂金黄色葡萄球菌大量生长福志贺菌大量生长厌氧血平板脆弱拟杆菌生长产气荚膜梭菌生长，β溶血碱性蛋白胨水霍乱弧菌大量生长大肠埃希菌抑制生长测定各种培养基性能的菌种弯曲菌琼脂空肠弯曲菌生长大肠埃希菌部分抑制TCBS平板霍乱弧菌生长，黄色菌落副溶血性弧菌生长，蓝绿色菌落沙保弱琼脂白色念珠菌生长大肠埃希菌部分或完全抑制需氧血液增菌液肺炎链球菌生长化脓性链球菌铜绿假单胞菌白色念珠菌厌氧血液增菌液脆弱拟杆菌生长各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌阴性对照菌赖氨酸脱羧酶迟缓爱德华菌费枸橼酸杆菌鸟氨酸脱羧酶产气肠杆菌费枸橼酸杆菌精氨酸双水解酶阴沟肠杆菌普通变形杆菌蛋白胨水（靛基质）大肠埃希菌阴沟肠杆菌各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌阴性对照菌MR大肠埃希菌阴沟肠杆菌V-P阴沟肠杆菌大肠埃希菌枸橼酸盐（西蒙氏）产气肠杆菌迟缓爱德华菌苯丙氨酸脱氨酶雷极变形杆菌费枸橼酸杆菌O-F试验管铜绿假单胞菌（氧化型）洛菲不动杆菌（不利用）大肠埃希菌（发酵型）硝酸盐还原大肠埃希菌洛菲不动杆菌各种鉴别培养基的测试菌种培养基阳性对照菌阴性对照菌胆汁-七叶苷粪肠球菌化脓性链球菌脱氧核糖核酸琼脂粘质沙雷菌表皮葡萄球菌氰化钾肉汤产气肠杆菌迟缓爱德华菌丙二酸盐产气肠杆菌迟缓爱德华菌尿素琼脂雷极变形杆菌（快）大肠埃希菌肺炎克雷白菌（慢）半固体琼脂动力试验大肠埃希菌肺炎克雷白菌仪器设备的质量控制设备控制范围备注高压灭菌器121℃定期用嗜热芽胞杆菌测试（每月）孵育箱35±1℃定期加水水浴箱37±0.5℃定期加水、清洁内壁冰箱4±2℃定期清洁内部CO2箱5-10%淋病奈瑟氏菌检测效果厌氧箱美兰或铜绿假单胞菌测试厌氧条件生物安全柜更换滤网，紫外线消毒性能检测（每三个月）血液培养仪培养瓶进行少量生长试验；瓶位定期校正微生物鉴定仪探测部位定期清洁；鉴定卡、条、板测试标本检验过程的质量控制选择合理的检验项目选择适当的标本正确书写检验申清单直接诊断直接发现病原体---脓、脑脊液、胸腹水等无菌部位标本确定标本是否合格，并推测病原体---痰液标本发现病原体并进行初步计数---尿液标本为培养基和培养方法的选择提供信息病原菌的分离培养呼吸道标本接种血琼脂平板、巧克力平板、麦康复凯平板和沙保弱琼脂，并将巧克力血平板置5%-10%CO235℃环境中培养。粪便标本接种SS平板、麦康凯平板或中国蓝平板血液培养在血液增菌培养期间，应至少在24h∽48h盲目翻种一次，以后有可疑细菌生长即刻翻种，尽早发现病原菌。病原菌的鉴定菌落形态观察--涂片染色镜检--生化鉴定--血清学试验---氧化酶试验不应在糖类发酵选择性平板上进行，以免假阴性结果出现。---在肠道选择性平板上应挑取菌落进行生化反应，生化反应符合，血清学凝集阳性者可确认报告。不能从选择性平板上挑取菌落进行血清学凝集，会因为交叉抗原的存在或抗原的丢失而导致假阳性或假阴性。每次血清凝集试验时，应用生理盐水作对照。防止粗糙型菌落造成的假凝集药敏试验的质量控制要点培养基纸片菌量操作孵育：时间、温度、平板放置结果判断质控菌株纸片扩散法的质控菌株–金黄色葡萄球菌ATCC25923–大肠埃希菌ATCC25922–大肠埃希菌ATCC35218（用于β内酰胺酶抑制剂复合制剂）–铜绿假单胞菌ATCC27853–粪肠球菌ATCC29212–流感嗜血杆菌（用于HTM培养基）ATCC49247、49766–淋病奈瑟菌（用于GC琼脂）ATCC49226–肺炎链球菌（用于5%羊血MH琼脂）ATCC49619失控的常见的原因---质控结果记录错误---量取抑菌环直径时读数错误---标准菌株被污染或其它改变---接种的菌悬液太浓或过淡---0.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效---孵育温度或气体环境不正确---MH培养基质量有无问题---含药纸片失效检验后的质量保证检验后程序：也称分析后期。指检验后全部过程。包括检验结果的评审与报告---报告时间、分级报告、危急值报告及记录标本的处置---感染性废弃物菌种保存方法培养基保存法快速冷冻法冷冻干燥法菌种保管定期转种制备记录卡专人负责室内全面质量控制全面实施各项质量控制内容对人员要及时进行培训和考核严格审核标本和结果报告在日常标本中掺入模拟标本，进行盲点试验发现误差，应及时找出原因，进行改进室间质量控制的实施组织单位：各级临床检验中心和参考实验室工作任务：定期或不定期地进行熟练程度考核和盲点试验检查。定期或不定期地举办各种学习班，提高各级技术人员的技术水平，学习新的知识。提供或督促有关部门提供合格的标准化的试剂、抗血清、培养基等实验必需品。盲点质量控制---qualitycontrolblindunknown方法质控管理机构将模拟标本混入临床普通标本，送入实验室进行常规测定。评价质控管理机构负责收回和评价实验结果，根据参加的规模和鉴定的正确数，计算鉴定正确率及所有参加实验室的平均分，以及每个实验室的得分。谢谢