第六讲--芳酸类药物

第六章芳酸及其酯类药物的分析芳酸及其酯类药物1.共同点：苯环、羧基2.不同点：取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）3.包括：芳酸、芳酸盐、芳酸酯主要内容分类与性质鉴别特殊杂质检查含量测定芳酸类药物苯甲酸类水杨酸类其他芳酸类羧基与苯环直接相连一、分类1.苯甲酸类SO2COOHN(CH2CH2CH3)2丙磺舒NHCOOHCH3CH3甲芬那酸苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸(钠)(Na)(2)苯环：UV和IR特性(1)羧基：酸性2.水杨酸类COONaOHNH2对氨基水杨酸钠?COOHOCOCH3阿司匹林双水杨酯?COOHOOOH双水杨酯COONHCOCH3OCOCH3贝诺酯COOHOHFF二氟尼柳OCOHOH水杨酸(钠)(Na)1、酚羟基：与FeCl3反应2、羧基：酸性、成盐、成酯3、酯基：水解、异羟肟酸铁反应4、UV和IR特性水杨酸类3.其他芳酸类ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯CHCH3COOHCHCH2CH3CH3布洛芬二、理化性质（1）少数为液体，多数为固体，具有一定熔点（2）芳酸在水中微溶或不溶，易溶有机溶剂（3）碱金属盐易溶于水(4)酸性:pKa3～6，中等强度的酸或弱酸(5)酯：水解生成相应的酸和醇(6)苯环：UV和IR特性盐酸、硫酸＞芳酸＞碳酸、酚酸+碱→盐酸+醇→酯第二节鉴别试验与铁盐的反应重氮化-偶合反应水解反应分解产物反应紫外吸收光谱红外吸收光谱薄层色谱法高效液相色谱法化学法光谱法色谱法1、与铁盐反应1）与FeCl3反应：（酚羟基的鉴别）+COO-O-2Fe3Fe+12HCICOOHOH4FeCI36中性或弱酸性（pH4~6），生成紫堇色配合物COONaOHNH2对氨基水杨酸钠?COOHOCOCH3阿司匹林双水杨酯?COOHOOOH对氨基水杨酸钠加热煮沸与FeCl3生成紫堇色加酸微酸化与FeCl3生成紫红色双水杨酯与FeCl3生成紫色pH5.0~6.0溶液，与FeCl3生成米黄色沉淀3）丙磺舒2）苯甲酸（盐）赭色苯甲酸（钠）碱性或中性3FeCl4）异羟肟酸铁反应R—C+H2NOH·HCl+FeCl3→异羟肟酸铁（紫色）ClOCCH3CH3COOC2H5+NH2OHHCl+2KOHClOCCH3CH3CNHOK+OFe3+ClOCCH3CH3CNHOOFe/3异羟肟酸铁（紫色）氯贝丁酯2、芳伯氨基的反应：重氮化—偶合反应重氮盐~OH萘酚橙黄猩红色22rHClNaNOANH重氮盐COONaOHNH2+NaNO2COOHOHNN+HClCOOHOHNN++OHOH-COO-OHNNOHCl-.Cl.--萘酚橙红色↓对氨基水杨酸钠贝诺酯有该反应吗？如何进行？COOOCOCH3NHCOCH3+O3H2HCIOHNH2HCI+OHCOOH+COOH32CHHONH2+2HCIHON+2Cl-+O2HNaCI2N2+CI-HO+OH+NaOHOHNNOH+OHNaCI2+NaNO2阿司匹林醋酸臭气↑3、酯结构的反应：水解反应COONaOHCOOHOCOCH3+Na2CO3+H2SO4COOHOHCOONaOHCH3COONa+H2SO4CH3COOH白色+CH3COONa苯甲酸苯甲酸钠42SOH4、分解产物的反应管壁凝结成白色升华物丙磺舒＋NaOHNa2SO33+HNO硫酸盐显硫酸盐反应(含硫)2SO高温丙磺舒臭味5、紫外分光光度法1%maxmin1cmAAEA12、、、、原理：此类药物分子中含有苯环而显示特征吸收光谱，可作为鉴别依据。紫外分光光谱法药物溶剂max/minE值A值A1/A2丙磺舒盐酸-乙醇(20g/ml)225，2490.67甲芬那酸盐酸-乙醇279，3500.69-0.74,0.59-0.601.15-1.30贝诺酯无水乙醇240730-760氯贝丁酯甲醇(10g/ml)(0.1mg/ml)226;280，288460;44，31布洛芬0.4%NaOH265，273;245，2716、红外吸收光谱法峰位（cm-1）峰强度归属基团或化学键3750～3000强O-H、N-H(羟基,胺基)3300～3000弱～中等≡CH、=CH、Ar-H3000～2700弱～强2400～2100弱～中等C≡N1900～1650强C=O(醛,酮,羧酸及衍生物)1670～1500中等～强C=C、C=N、N-H1300～1000强C-O（醇,酚,醚,酯,羧酸）典型化学键的红外特征吸收峰C-H（烷基）、-CHO7、薄层色谱法8、高效液相色谱法1.鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾2、三氯化铁与水杨酸类药物显色反应最适宜酸度是A强酸性B弱酸性C中性D弱碱性E强碱性3.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是A.苯酚B.乙酰水杨酸C.水杨酸D.醋酸钠E.醋酸苯酯4、能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有A．苯甲酸钠B．水杨酸C．氢化可的松D．丙酸睾酮5、中性或碱性条件下，可与FeCl3试液反应，生成赭色沉淀的药物是A.水杨酸钠B.对氨基水杨酸钠C.乙酰水杨酸D.苯甲酸钠6、阿司匹林是哪一种芳酸的酯？A.苯甲酸B.水杨酸C.对氨基水杨酸D.对氨基苯甲酸7、水杨酸在中性或弱酸介质中和FeCl3发生呈色反应的原理是？A.Fe3+水解B.Fe3+氧化所含酚羟基成醌C.所含酚羟基将Fe3+还原成Fe2+酸D.所含酚羟基与Fe3+生成有色配位化合物8、阿司匹林化学结构中可被用于质量控制的部分是？A.苯环B.羧基C.酯键D.酚羟基阿司匹林红外吸收光谱中主要特征的波数是A.3300~2300cm-1B.1760,1695cm-1C.1610,1580cm-1D.1310,1190cm-1E.750cm-110.羰基基VC=O9.羟基VOH11.苯环VC=CABC(一)阿司匹林中特殊杂质的检查ONa2COONaCOONaH+OHCOOHOHCOOHOCO)(CH23+乙酰化COOH3OCOCH+COOHCH3第三节特殊杂质检查1、合成工艺OH32()CHCOOOHOCOCH3醋酸苯酯OHOH—COOH+OH—COO—OH水杨酸苯酯OHOH—COOHOCOCH3OH—COO—OHOCOCH3+2、杂质及其检查方法酚乙酰水杨酸苯酯（1）溶液澄清度：阿司匹林Ch.P(2010)【检查】取本品0.50g，加温热至约45℃的碳酸钠试液10ml溶解后，溶液应澄清。检查——酚、苯酯类杂质。检查原理——酚、苯酯类杂质不溶于Na2CO3而阿司匹林溶于Na2CO3（2）水杨酸：生产过程中乙酰化不完全贮藏过程中水解产生检查原理—水杨酸有游离酚羟基可与Fe3+反应，产生紫堇色，而阿司匹林无游离酚羟基，无此反应。来源供试品(阿司匹林)溶液水杨酸对照液水杨酸检查合格，不超标供试液制备：取本品0.1g，精密称定，置10ml量瓶，加1%冰醋酸甲醇溶液，溶解稀释至刻度，作供试品溶液。Ch.P(2010)利用HPLC法检查阿司匹林中水杨酸对照液制备：取水杨酸对照品10mg，精密称定，置100ml量瓶，加1%冰醋酸甲醇溶液，溶解稀释至刻度，摇匀，精密吸取5ml，置50ml量瓶，用1%冰醋酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。色谱条件：照高效液相色谱法(附录VD)试验，用十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(20:5:5:70)为流动相，检测波长为303nm。测定：精密量取供试品溶液、对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与水杨酸保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。。NH2OHCOONa-CO2H2ONH2OHNH2OH（二）对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查合成降解OOHOH2NOHNH2OOHOHOOHOH[O]NH2OH[O]氧化成联苯醌红棕色间氨基酚1、方法1——双相滴定法Ch.P(2005)原理——利用杂质易溶于乙醚，用乙醚提取，使两者分离，再用盐酸滴定，以甲基橙为指示剂。2、间氨基酚的检查NH2OH+HClNH2OH.HCl乙醚相水相双相滴定法〔ChP（2005年版）取本品，研细，称取3.0g，置50ml烧杯中加入用熔融氯化钙脱水的乙醚25ml，用玻璃棒搅拌1分钟，注意将乙醚溶液滤入分液漏斗中，不溶物再用脱水的乙醚提取2次，每次25ml，乙醚溶液滤入同一分液漏斗中，加水10ml与甲基橙指示液1滴，振摇后，用盐酸滴定液（0.02mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白实验校正，消耗盐酸滴定液（0.02mol/L）不得超过0.3ml。供试液制备：取本品精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml约含0.7mg的溶液。HPLC法检查对氨基水杨酸钠中间氨基酚对照液制备：取间氨基酚对照品精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml约含1.2μg的溶液作为对照品溶液。方法2----Ch.P(2010)色谱条件：照含量测定项下的色谱条件，以280nm为检测波长，测定测定：精密量取供试品、对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与间氨基酚保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.25%。。方法3——离子对HPLC法USP(29)色谱条件：分析柱——C18；流动相——磷酸盐缓冲液-甲醇-氢氧化四丁基铵检测波长——254nm内标溶液——磺胺溶液（5g/ml）杂质对照液——间氨基酚溶液（12g/ml）供试品溶液——对氨基水杨酸钠样品液（6.9mg/ml）系统适用性试验：杂质对照液10ml+内标溶液10ml100ml（1）供试品溶液10ml+内标溶液10ml100ml（2）R—取溶液(1)重复进样6次，间氨基酚与内标磺胺峰的分离度应大于2.5；RSD—小于7%（按A杂/A内比值计算）；测定方法：取溶液(1)和(2)分别进样，记录色谱图间氨基酚的含量%=10（C对/C样）（R样/R对）限量0.25%为何采用ion-pairHPLC法？对氨基水杨酸钠具碱性，在水溶液中易离解；离子型化合物或能解离的化合物用常规HPLC分离时，常会出现色谱峰拖尾和保留值不稳定等问题，用离子对色谱则能解决以上问题。离子对色谱适用于pKa在2-8的弱酸和弱碱性化合物的分离。离子对高效液相色谱把离子对试剂加入到流动相中，被分析的组分离子在流动相中与离子对试剂的反离子生成不荷电的中性离子对，从而增加溶质与非极性固定相的作用，使分配系数增加，改善分离效果，用于分离可离子化或离子型化合物。对于碱性化合物（B，如-NH2），用烷基磺酸盐（R-SO3Na）作离子对试剂。NaRSO33RSOBH3RSOBHHBBHNaRSO3对于酸类样品（RCOOH），用四丁基铵盐（TBA+X－）作离子对试剂。RCOOHHRCOOXTBAXTBATBARCOOTBARCOO氯贝丁酯中特殊杂质的检查合成工艺[缩合]，[水解]CH3COCH3，CHCl3，NaOHClOHClOCCH3CH3COONa[酸化]HClCH3COOHClOCCH3[酯化]C2H5OH，H2SO4COOC2H5CH3ClOCCH3对氯酚对氯苯氧异丁酸对氯酚——GC法Ch.P(2010)色谱条件：分析柱——5%SE-30（甲基硅橡胶），2m玻璃柱；载气——氮气；柱温——160C；检测器——FID杂质对照液——0.0025%对氯酚的三氯甲烷溶液供试品溶液：样品10g+NaOH氯仿洗涤（弃取），水层+HCl用氯仿提取加氯仿至10ml进样——取对照液和样品液分别进样测定，规定——样品中对氯酚峰不得大于对照品峰（0.0025%）第四节含量测定•酸碱滴定法（阿司匹林为例）•双相滴定法（苯甲酸钠为例）•紫外分光光度法(丙磺舒、阿司匹林胶囊为例)•高效液相色谱法(阿司匹林栓剂为例)1.直接滴定法COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O