浙江省地方标准蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定方法

ICS67.050X04备案号：19052-2006浙江省地方标准DB33DB33/T601—2006蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定方法Methodfordeterminationoffluvalinateresiduesinbeeproducts2006-02-07发布2006-03-08实施浙江省质量技术监督局发布DB33/T601—2006I前言本标准由浙江省质量技术监督局提出并归口。本标准起草单位：农业部农产品质量监督检验测试中心（杭州）、浙江省标准化研究院。本标准主要起草人：朱亚红、王小骊、胡秀卿、吴珉、董秀金、李宁。DB33/T601—20061蜂产品中氟胺氰菊酯残留量测定1范围本标准规定了蜂产品（蜂蜜、蜂王浆、蜂花粉）中氟胺氰菊酯残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于蜂产品中氟胺氰菊酯的残留量测定。本方法检出限为0.01mg/kg。2原理蜂产品中氟胺氰菊酯经丙酮与石油醚混合溶剂提取，提取液经氯化钠水溶液盐析，中性氧化铝层析净化，高效液相色谱仪紫外检测器分析，根据保留时间定性，外标法定量。3试剂与材料除非另有说明，在分析中均为分析纯试剂和GB/T6682中规定的至少二级的水。3.1丙酮。3.2二氯甲烷。3.3氯化钠水溶液：称取10g氯化钠加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。3.4无水硫酸钠：350℃灼烧2h，冷却后置干燥器备用（0℃-4℃密封保存三个月）。3.5石油醚：沸程60℃-90℃。3.6甲醇。3.7甲醇：色谱级。3.8中性氧化铝：80目-100目150℃烤3小时，置于干燥器中备用。使用前加入5%水脱活12h。3.9氢氧化钠。3.10氟胺氰菊酯标准溶液(国家标准物质)：100mg/L。3.11使用时用甲醇稀释成线性范围浓度：0.05mg/L-1.00mg/L。3.12玻璃层析柱：1cm×15cm。4仪器4.1旋转蒸发器。4.2高速匀浆机：40000r/min。4.3高效液相色谱仪：带紫外检测器。5样品制备蜂蜜、蜂王浆取样后直接放入具塞塑料瓶，蜂花粉捣碎机磨碎后放入封口塑料袋，试样放入冰箱（0℃-4℃）贮藏备用。DB33/T601—200626分析步骤6.1提取称取试样10.0g，放入250mL平底三角烧瓶。加5mL蒸馏水和80mL丙酮(3.1)＋石油醚(3.5)（1：1）混合液在高速匀浆机上提取，时间2min-3min,平底三角烧瓶中静止分层，上清液倒入250mL分液漏斗，底层再加入5mL蒸馏水和以上混合液50mL，继续在高速匀浆机上提取1min，平底三角瓶静止分层，上清液合并入分液漏斗。加入10％氯化钠水溶液50mL进行液－液分配。水相倒入另一分液漏斗，再用30mL、30mL石油醚(3.5)反萃取两次，合并石油醚液，石油醚液过无水硫酸钠，在40℃下浓缩至1mL-2mL，再用氮气吹干，待净化。6.2净化取玻璃层析柱（3.12），上下两端加2cm无水硫酸钠，中间加4g中性氧化铝（加5％水脱活）。用30mL石油醚预淋，弃去。上述浓缩样品用50mL石油醚＋乙酸乙酯（95：5）分多次溶解后移入层析柱淋洗，收集淋洗液，在40℃下浓缩至1mL-2mL，再用氮气吹干，用甲醇(3.6)溶解，倒入10.0mL刻度细管至刻度，待进样。6.3液相色谱条件6.3.1色谱柱:C18ODS,4.0mm×250mm，5µm。6.3.2流动相:甲醇＋水（90:10），流速：1.0mL/min。6.3.3吸收波长:254nm。6.3.4柱温:室温。6.3.6色谱测定分别吸取20µL标准溶液和试样溶液，注入液相色谱仪，以保留时间定性，根据试样蜂高或蜂面积，确定氟胺氰菊酯的标准工作液浓度，使响应值在仪器的检测线性范围内，进行外标法定量。6.4空白试验除不加试样外,均按上述步骤进行。7结果计算试样中氟胺氰菊酯含量用质量分数w计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式（1）计算。A1×V1×V3×ρw＝…………………………（1）A2×V2×V4×m式中：w－蔬菜、水果中氟胺氰菊酯（质量分数计）含量（mg/kg）；ρ－标准溶液中氟胺氰菊酯质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；A1－试样中组分的峰面积或峰高，积分单位；A2－标准样中组分的峰面积或峰高，积分单位；V1－试样中提取的总体积，单位为毫升（mL）；V2—净化用提取液的总体积，单位为毫升（mL）；V3—浓缩后甲醇定容体积，单位为毫升（mL）；V4—进样体积，单位为微升（µL）；m－试样的质量，单位为克（g）。计算结果保留小数点后两位。DB33/T601—200637准确度与精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。8氟胺氰菊酯的液相色谱图标准溶液色谱图见图1。图1、氟胺氰菊酯标准溶液色谱图