液相色谱仪维护(岛津分析中心)

高效液相色谱仪--维护培训班岛津广州分析中心詹松Tel:020-87108653Fax:[phone].日常维护的要点液相系统维护流程图吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器手动进样器检测器日常维护材料：不锈钢烧结，孔径10um故障：堵塞现象：管路中不断有气泡生成措施：1.用5％～20％的稀硝酸溶液，超声波清洗，再用蒸馏水清洗2.堵塞严重时,分别按下面的顺序超声波清洗:水→异丙醇→水→5％～20％的稀硝酸溶液→水注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断吸滤头日常维护单向阀LC-10ATvp泵：串联式往复泵LC-10ADvp泵：并联式往复泵日常维护单向阀结构抛光面透明塑料垫片宝石球吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头流动相单向阀原理吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头日常维护故障1：宝石球粘附于垫片现象：泵无法吸液或排液，流路不通措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，使宝石球与垫片分开2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗单向阀日常维护故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好现象：系统压力波动大措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗单向阀日常维护故障：密封圈磨损而导致密封不良现象：系统压力波动大或漏夜措施：更换密封圈注意点：更换密封圈拆卸泵头前，柱塞杆复位（P－SET）柱塞密封圈流动相泵头清洗管路柱塞杆密封圈日常维护故障：堵塞现象：系统压力波动大或压力偏高措施：5％稀硝酸，超声波清洗判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速1mL/min，如压力0.3MPa，则可能堵塞。先确认排液阀打开状态压力为零。管路过滤器排液阀压力传感器管路过滤器流动相日常维护紫外检测器参比池样品池光线光电倍增管性能判断新的时候ABSMPLEN800100100REFEN900800150A:池子、透镜污染B:灯老化日常维护紫外检测器日常维护故障：样品池污染现象：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPLEN和REFEN，如两者相差较大，则样品池受污。措施：1.轻微污染时,用针筒注入异丙醇，清洗样品池;2.如污染严重，拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。紫外检测器日常维护更换氘灯（紫外检测器）•判断氘灯能量：设定220nm波长，检查参比池能量，如能量低于800，需更换氘灯。•操作注意点：不要用手直接接触氘灯表面2.手动进样器手动进样器的原理图装填状态进样状态交叉污染的原因手动进样法•普通方法1.在进样(Inject)状态下清洗针口2.将扳手切到装填(Load)状态下插入微量注射器3.注入样品4.将扳手切到进样(Inject)状态5.抽针、清洗针口手动进样法•便捷方法1.在进样(Inject)状态下插入微量注射器2.将扳手切到装填(Load)状态3.注入样品4.将扳手切回到进样(Inject)状态5.抽针、清洗针口日常维护操作注意点：1）插针应插到底2）进样应使用液相色谱专用平头进样针3）清洗应使用专用针口清洗器手动进样器定子转子塑料箍弹簧不锈钢套3.有机溶剂的优与劣什么时候需要“HPLC”级有机溶剂1.等浓度洗脱法的微量分析用光谱进行判断2.梯度洗脱法分析3.1等浓度洗脱法的微量分析优级噪声噪声目的成分目的成分HPLC级优级HPLC级测试波长上的噪声水平与流动相的吸光度成正比乙腈3.2梯度洗脱法分析需要“HPLC”级有机溶剂理由：即使没有注入被测样品，因流动相的不纯物质，造成出峰.给分析结果带来影响.3.3梯度洗脱法的注意点•1.流动相使用HPLC级有机溶剂。•2.查看空白实验的数据。•3.遵守分析周期。（最初的分析数据不采用）4.谈谈缓冲液注意点选择缓冲液注意1.确定最佳分离状态时的流动相pH值(pH酸度计校验了吗?)2.选择具有与流动相的pH相近的pKa的缓冲液（即使浓度稀也具有较强的缓冲能力）3.确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）代表性弱酸的pKapK1pK2pK3醋酸4.87柠檬酸3.134.766.40磷酸2.167.2112.32注意点(1).现配现用.(配制时注意前后的pH值一样)(2).工作完毕后及时冲洗LC系统(常用的ODS柱怎么冲洗?)(3).梯度洗脱时,确认了缓冲液与有机溶剂的混合没问题了吗?*用不完,舍不得倒掉;放冰箱,能放几天?5.关于脱气脱气的目的1.防止由气泡的产生引起的故障2.防止由溶解（在液体中的）气体量的变动引起的检测不稳定程度1）示差折射率检测器*使折射率变化2）UV检测器（200nm以下）*溶解氧气有吸收3）荧光检测器*溶解氧气有消光作用脱气的方法1.减压吸气脱气法*可以抑制配制流动相时产生的气泡*只是暂时的脱气法*不能解决因溶解气体造成的问题2.He清除法3.使用氟树脂膜的减压脱气法4.超声波脱气法He清除法调压阀排气阀往送液泵流动相过滤器使用氟树脂膜的减压脱气法氟树脂膜真空室往送液泵真空泵控制器流动相6.保护柱保护柱的位置阻尼管保护柱泵进样器分析柱保护柱的作用•代替分析柱过滤样品中的杂质和捕集样品中的强保留组分;容易更换，降低成本。7.ODS柱如何使用和延长色谱柱的使用寿命1.样品预处理2.流动相(流量、柱压、缓冲盐)3.保护柱4.pH范围5.温度6.色谱柱的储存7.条件允许色谱柱不要混用8.关于ODS柱补修峰的变形根部变宽有肩或分叉峰产生有肩或分叉的原因1.色谱柱入口处塌陷2.柱床结构变化3.填料表面变化4.色谱柱污染5.反冲处理过6.样品劣化不稳定（生成氧化物、分解物等）判断标准所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化柱的补修用分析时的两倍流量定量送液填料的取出容器甲醇送液未污染的部分恢复例柱修补后谢谢各位！