脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)

脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）------直揭动脉粥样斑块稳定性目录2Lp-PLA2特点及临床应用4诺尔曼Lp-PLA2检测13Lp-PLA2的临床指导1脑卒中与Lp-PLA2脑卒中分类短暂型缺血性脑卒中（TIA）脑梗塞（脑血栓、脑栓塞）脑出血蛛网膜下腔出血缺血性(60-70%)出血性(30-40%)流行病学特点脑卒中明显存在四高现象：高发病率：根据统计中国每年发生卒中病人达200万，发病率高达120/10万；高死亡率：中国每年卒中病人死亡120万；高致残率：现幸存中风病人700万，其中450万病人不同程度丧失劳动力和生活不能自理，致残率高达75%；高复发率：我国脑中风病人出院后易再复发，每复发一次，加重一次，第一年的复发率是30%，第五年的复发率高达59%；流行病学特点随着他汀类药物以及药物洗脱支架的临床应用，冠状动脉粥样硬化性疾病的发病率和致死率明显下降。每年全世界仍有大约有2千万人死于急性心血管事件，而且大部分人没有前驱症状，现有的诊断技术难以在心血管事件前发现受害者。导致急性心血管事件的主要原因是动脉粥样硬化（AS）斑块破裂和血栓形成，后者取决于AS斑块的不稳定性，即易损性（vulnerability）。易损斑块的基础和临床研究已成为近年来AS领域中的研究热点。易损斑块易损斑块主要包括破裂斑块、侵蚀性斑块和部分钙化结节性病变。斑块内炎症是引起斑块不稳定的关键因素;易损斑块变成罪犯斑块是ACS发病的共同机制。易损斑块概念的临床意义陷阱–冠脉粥样硬化是一种节段性或局部的疾病，只需要简单地用冠脉搭桥或PCI处理真相–斑块稳定性的临床意义远大于斑块的大小–病人常见到不止一个易损斑块–系列IVUS研究发现许多人有不止一个破裂斑块–血管重建不能解决所有问题脑卒中与Lp-PLA2脑供血不足、脑动脉壁发生病理改变、动脉粥样硬化脑组织缺血、缺氧、血流不畅TIA脑出血脑梗塞Lp-PLA2筛查脑卒中，揭示血管内斑块病变程度，脑血管炎性目录2Lp-PLA2特点及临床应用4诺尔曼Lp-PLA2检测1脑卒中与Lp-PLA23Lp-PLA2的临床指导内皮功能受损炎症斑块血栓形成动脉粥样硬化（AS）与炎症1.RossR.Atherosclerosis-aninflammatorydisease.NEnglJMed1999;340(2):115–126.2.ChisolmGM,SteinbergD.Theoxidativemodificationhypothesisofatherogenesis:anoverview.FreeRadicBiolMed2000;28:1815-1826.•动脉粥样硬化是一种过程性的炎症反应疾病，而斑块的破裂是一个急性的发病过程•炎症反应直接作用于粥样斑块的形成和破裂•炎症反应标志物可帮助预测心脑血管事件的风险来源：生命时报2011年2月15号第09版现有筛查方法A内皮损伤的指标:粘附分子：ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、PECAM-1、内皮因子、粘蛋白等；细胞因子：IL-6、IL-8、TNF-α、ET-1等；B炎症指标：hsCRP、WBC、血清淀粉样蛋白A；C凝血因子：vWf、t-PA、PAI-1、FVII、FV、凝血素、纤维蛋白溶酶原、纤维蛋白原、D-二聚体等；D脂代谢指标：ApoE、ApoB、LPL、Lp(a)、sd-LDL、ox-LDL、ox-Lp(a)、CETP、RBP4、pre-β1-HDL等。生化指标成像技术颈动脉超声，造影、CT-CTA、DSA、MRA等A脉搏波传导速度（PWV）：反映动脉僵硬度的早期敏感指标，是AS性CV事件的独立危险因素。B颈总动脉内中膜厚度（C-IMT）：有研究显示C-IMT是CV事件危险性的独立预测指标。C踝臂指数（ABI）：踝部动脉收缩压和双侧肱动脉收缩压的最高值之比，冠状动脉狭窄程度越重，ABI值越低，对冠状动脉疾病的严重程度有较好预测价值。D多排螺旋CT冠状动脉钙化积分（CAC）：用于冠状动脉钙化的定性定量分析，明确钙化的部位、数目、体积及密度，对PCA的筛查有重要意义。动脉功能和结构的评估现有筛查方法CVD是常见复杂性疾病，除传统危险因素外，基因的改变和修饰、环境危险因素共同作用影响着动脉粥样硬化的发生发展。遗传指标能够为临床提供在症状出现之前，或在造成不可逆器官损害之前就能做出诊断的可能，其发生异常早于生化指标、动脉功能和结构的改变、并能够对患者的预后及治疗反应进行评估PCA遗传指标现有筛查方法PCA筛查方法-遗传指标易感基因DNA甲基化蛋白质组微小核糖核酸(miRNA)易感基因易感基因：在适宜的环境刺激下能够编码遗传性疾病或获得疾病易感性的基因应用基于候选基因的关联分析和基于全基因组的连锁分析和关联分析策略发现了数十个冠心病相关基因易感等位基因，如ApoE基因的E4，MEHFR基因的C677T，ACE基因的DD，ApoB基因的GG，PAI1基因的4G/5G等相继报道了多种易感位点和区域，如9q21.3、2q36.3、6q25.1、16q23、12p12.1等区域。对心血管疾病预警、高危人群的筛查和预测、临床早期诊断、新药研发具有重要的科学价值进展DNA甲基化最早发现的表观遗传修饰方式之一；发生在CpG二核苷酸上对胞嘧啶的共价修饰，由DNA甲基化转移酶（DNMT）介导；基因组DNA甲基化模式改变会直接或间接抑制基因转录，影响基因表达。全基因组DNA甲基化分析、特异基因DNA甲基化分析；发现DNA甲基化谱的改变是As的早期标志物，亦可能是As形成的原因；基因组甲基化水平的升高或降低与CVD的发生尚存在争议；某些特异基因的甲基化水平与CVD密切相关，如ESR1（雌激素受体α）、ESR2（雌激素受体β）……简介蛋白质组：一个细胞或组织中基因组所表达的全部蛋白质研究：①对蛋白质表达模式的研究②蛋白质功能模式的研究核心技术：双向凝胶电泳(2-DE)、质谱分析“差异”蛋白质组学，即筛选和鉴定不同种类、不同状态或不同时期下各样本之间蛋白质组中蛋白质组成的变化-寻找疾病特异性蛋白。发现心肌梗死、高血压、心力衰竭等心血管疾病中均存在蛋白质组的变化，鉴定几百种病理状态下的心血管疾病特异性蛋白质，为CVD的早期诊断、疗效监测和预后判断提供了依据。已建立心肌蛋白质组2-DE数据库、人类心脏蛋白质联合二维电泳数据库等血清/血浆蛋白质组-为蛋白质组研究进入临床奠定基础。蛋白质组微小核糖核酸(microRNA,miRNA)GroupaUnivariateanalysis#Multivariateanalysis*UnadjustedOR(95%CI)P-valueOR(95%CI)P-valueHigh-riskgroup(n=115)miR-18621.67(10.27-45.75)0.001106.62(11.49-989.72)0.001miR-208b3.31(2.17-5.06)0.0017.68(2.27-25.98)0.001miR-4994.68(2.59-8.47)0.00139.21(3.32-463.60)0.004miR-146a2.29(1.52-3.44)0.0013.26(1.55-6.88)0.002Intermediate-riskgroup(n=40)miR-1869.95(4.46-22.18)0.00141.44(4.00-428.92)0.002miR-208b2.79(1.77-4.14)0.00111.73(3.06-45.01)0.001miR-4994.09(1.93-8.69)0.00176.36(5.06-1152.63)0.002miR-146a1.60(0.93-2.75)0.0882.25(0.60-8.48)0.229Low-riskgroup(n=112)miR-1864.12(2.01-8.44)0.0013.43(1.41-8.34)0.007miR-208b1.69(1.06-2.63)0.0272.06(1.03-4.11)0.041miR-4991.42(0.76-2.66)0.2731.31(0.51-3.38)0.582miR-146a2.36(1.56-3.58)0.0011.86(1.22-2.83)0.004Inunivariateandmultivariatelogisticregressionanalyses,thehigh-risk,intermediate-risk,low-riskorcontrolgroupwastreatedasadependentfour-categoryvariable.AnORwasconsideredstatisticallysignificantwhenthelowerlimitofthe95%CIwas1.0andtheP-valuewas0.05.#Onlyoneofthe4miRNAswasincludedinthemodel.*Theage,gender,BMI,hypertension,diabetesmellitus,smokingandfamilyhistorywereadjustedinthemodel.aThereferencecategorywasthecontrolgroup.UnivariateandmultivariatelogisticregressionanalysesofserummiRNAsforcardiovascularriskstratification成像技术心肌酶检测hs-CRP血脂常规检测心肌梗死发生后才会出现异常，因而失去了预防和监测意义。1.适用于特点部位，量评估斑块的活跃程能力较差；2.服用造影剂易造成并发症，CT造成辐射伤害；3.费用高不适用于普检、预防和监测。易受急性疾病（包括感冒、细菌感染以及代谢综合症等）干扰，缺乏对血管炎症检测的特异性。无法预警动脉粥样斑块的炎症程度，无法针对急性卒中给予有效的检测。传统预测方法及其局限性需要一种简便、有效预测心脑血管疾病的标记物一种独立有效的炎症标志物Lp-PLA2脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）分子量45kDa，钙独立的脂肪酶，由441个氨基酸组成•主要由巨噬细胞分泌•主要存在于低密度脂蛋白（80%）和高密度脂蛋白（20%）中•直接参与导致动脉粥样硬化的血管炎症反应source：WikimediaCommonsLp-PLA2的分子结构示意图1.AsanoK,OkamotoS,FukunagaK,etal.Cellularsource(s)ofplatelet-activating-factoracetylhydrolaseactivityinplasma.BiochemBiophysResCommun1999;261:511-514.2.NakajimaK,MurakamiM,YanoshitaR,etal.Activatedmastcellsreleaseextracellulartypeplatelet-activatingfactoracetylhydrolasethatcontributestoautocrineinactivationofplatelet-activatingfactor.JBiolChem1997;272:19708-19713.Lp-PLA2特点Lp-PLA2的致As作用Lp-PLA2可水解脂蛋白Sn-2位含有多不饱和脂肪酰基的氧化卵磷脂（ox-PC），生成促炎因子：溶血卵磷脂（lyso-PC）和氧化型游离脂肪酸（ox-FFA），两者促发了一系列促As反应。Lp-PLA2水解动脉内膜上的ox-PC溶血卵磷脂(lyso-PC)和氧化型游离脂肪酸(ox-FFA)刺激粘附因子和细胞因子的产生，导致单核细胞向内膜聚集单核细胞衍生成巨噬细胞，并吞噬ox-LDL变成凋亡的泡沫细胞巨噬细胞和泡沫细胞聚集形成动脉斑块，内皮功能障碍诱导细胞凋亡斑块破裂，产生、释放