无菌医疗器械的灭菌

灭菌Sterilization灭菌Steriliation使用物理或者化学的方法，破坏所有的微生物包括数量巨大并且具有抵抗力的细菌芽孢灭菌方法环氧乙烷灭菌辐照灭菌（包括伽马射线、电子束及X光）蒸汽灭菌(100kPa蒸汽压力，温度为121摄氏度,维持15-30分钟)过滤灭菌(过滤器和滤膜都要在高压灭菌锅121度灭菌30分钟,然后要在无菌超净工作台上取出后安装到位,再进行过滤,一般要达到完全除菌要选0.22微米的滤膜)干热灭菌(干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法,干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果，一般规定：135-140℃灭菌3-5h；160-170℃灭菌2-4h；180-200℃灭菌0.5-1h)医疗器械的灭菌环氧乙烷灭菌原理COOHCO-O-CH2CH2OHProteinSH+CH2-CH2PS-CH2CH2OHNH2ONH-CH2CH2OHOHO-CH2CH2OH菌体蛋白质（具活性）环氧乙烷反应后菌体蛋白质（失去活性）灭菌前灭菌后医疗器械的灭菌术语和定义1.实际上，无法证实对于无微生物存在的绝对声明2.在灭菌过程中，微生物的死亡率由指数来表征；因此任何单位产品上的微生物的存在可用概率来表示3.灭菌确认水平（SterilityAssuranceLevel,SAL）灭菌后单个产品上微生物存活的概率SAL≤10-6医疗器械的灭菌医疗器械的灭菌热原/内毒素热原指能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖和微量蛋白质的复合物，它的特殊性不是细菌或细菌的代谢产物，而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。测试方法：兔法/鲎试剂法医疗器械的灭菌灭菌方法的选择灭菌方法器械示例危害固有安全的设计防护措施安全性信息蒸汽灭菌活组织取样器高温（材料降解）使用耐高温的材料监视并记录压力和温度包装和装载的说明EO灭菌注射器EO（EO残留）使用非多孔材料监视并记录EO浓度和解析时间包装和装载说明钴-60灭菌髋关节辐照（材料降解）使用耐辐射的材料监视并记录辐照强度包装和装载说明质量管理体系的要求符合ISO11135-1:2007要求过程控制及记录无菌试验验证及年度确认医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌安全性和有效性评估EO灭菌过程对产品的安全性和有效性是否会造成影响：灭菌过程中承受的压力对完整性的影响灭菌过程时间、温度、湿度及惰性气体对产品的影响使用新的材料可能导致较高的EO残留对产品包装的影响安全危害（可滤出的材料、电池或液体）灭菌循环次数微生物的性质在规定的时间间隔内，评估产品的生物负载（Bioburden）医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌EO产品族在每一个EO产品族或EO处理组内，应选取一个具有代表性的产品或一个最难进行灭菌的产品，用于灭菌确认如果有新产品要加入一个已存在的EO产品族，应有专人进行技术审核，对比新产品和已经确认的产品之间的差异，如果两者相似或者差异对灭菌过程没有重大影响，则可以豁免进一步的确认，审核结果应形成文件医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌空载（1）测量空柜空间温度分布达到真空的程度和速度柜体的泄露率处理过程中加入蒸汽时压力升高的程度加入EO时压力升高的程度，与用于监测EO浓度的因素的相互关系加入气体的温度高于确定的最低值，以保证加入的是气体而非液体医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌空载（2）排除EO所需达到的真空度和速度通入空气（或其他气体）时压力升高的程度和达到压力的速度以上后两个阶段重复的次数以及连续重复中的各种变化辅助系统的性能确认进行多次循环，验证控制的重现性医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌—灭菌确认满载（1）1.书面规定装载模式2.半周期法：•准备测试样品•建立灭菌相关参数•确定半周期•建立全周期灭菌参数医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌—灭菌确认满载（2）生物指示剂1.菌种：ATCC93722.产品最难灭菌的位置（ISO11138-1）3.生物指示剂的数量：•可用体积≤5m3，至少20个•可用体积大于5m3，小于10m3，每增加1m3，增加2个BI•可用体积大于10m3，每增加2m3，增加2个BI•Ⅰ号灭菌柜放置60个，Ⅱ号灭菌柜放置30个4.生物指示剂的接种量：≥1065.生物指示剂的D值：≥2.5分钟6.测试结果可接受标准：所有BI培养均无生长医疗器械的灭菌—环氧乙烷灭菌—常规控制1.灭菌性能确认合格，并建立产品全周期灭菌参数后，应对产品进行全周期灭菌。2.常规监控生物指示剂的数量为验证数量的一半。3.应建立形成文件的灭菌产品放行准则：•物理循环参数•BI无菌试验•EO残留（IntimaII放行标准10ug/g）4.应测量并记录每一批灭菌参数无菌医疗器械生产环境控制生产环境的污染1.与生产环境质量相关的微粒污染2.微生物污染：•自身污染—由于人员自身带菌而污染•接触污染—由于和非完全无菌的用具、器械而污染•空气污染—由于空气中所含细菌的沉降、附着或被吸入而污染•其他污染—由于昆虫等其他原因而污染3.细菌还可能产生毒性物质、色素等代谢产物污染源污染类型示例来源（举例）处理方法（举例）非活性（粒子）–金属斑点–服装纤维–设备–员工服装–外界空气–水供应–浮游粒子通过HEPA过滤–接触地方清洗和灭菌–水纯化系统活性（微生物）–细菌–真菌–人员–水–外界空气–设备、工具–辅料、原材料–限制微生物对产品的污染–浮游粒子通过HEPA过滤–液体无菌过滤（0.2m）–组分蒸汽灭菌或辐射灭菌内毒素（通常和浮游菌不相关）来自革兰氏阴性菌细胞壁–人体–湿的容器、设备表面–高温（200℃，根据时间决定）–蒸馏–EO作用生产环境的污染人体是微生物和尘埃污染的主要来源一个字母“D”的发音可产生30个颗粒（≥5m）说话一分钟可产生15000~20000个颗粒（≥5m）行走可可产生5000000个颗粒微生物大量存在于空气和人体内外表面，包括病毒、细菌、霉菌等人体携带的微生物数量惊人，且根据个人卫生习惯的不同因人而异洁净室的概念洁净室不仅仅限于“洁净”，而是一个对换气次数、静压差、温度、湿度、照度等都有要求的综合体。洁净室是空气的洁净度达到一定级别的可供人活动的空间，其功能是控制微粒及微生物的污染。对于洁净室的质量来说，设计、施工和运行管理各占三分之一。空气净化主要过程利用过滤器有效地控制送入室内的全部空气的洁净度利用合理的气流组织排除已发生的污染，由送风口送入洁净空气，使室内产生的微粒和细菌被洁净空气稀释后强迫其由回风口进入系统的回风管路，在空调设备的混合段和从室外引入的经过过滤的新风混合，再经过进一步过滤后又进入室内，通过反复的循环可以把污染控制在一个稳定的水平上，这个水平就应该低于相应的洁净度级别通过调整，使不同级别洁净室室内的空气静压差大于5帕，与室外大气大于10帕，防止外界污染或交叉污染从门或各种缝隙部位侵入洁净室内空气过滤和送风系统空气净化调节系统向洁净室输送洁净空气，以控制和调节洁净室内的温度、湿度、新空气量、静压差、尘埃数、菌落数等环境参数。个级别洁净度的空气净化处理一般应采取初效、中效、高效过滤器三级过滤。独立的洁净车间应采取集中式中央净化空气调节系统。初、中效过滤器应视情况定期清洗，晾干后可重复使用，高效过滤器如发现风速降低或破损时应更换。气流组织洁净室气流应满足洁净度要求，关键操作点应位于洁净气流的上风侧，应使洁净室气流流向单一。非单向流洁净室内设置操作台时，其位置应远离回风口。产品不应摆放在回风口附近，因回风口处的洁净度比较差。回风口应均匀分布在洁净室的下部，高度应低于工作台面。洁净室内有局部排风装置时，其位置应设在工作室气流的下风侧，以免气流短路。洁净级别的设置无菌医疗器械生产洁净室的洁净度等级，按洁净室空气中的含尘浓度和含菌量，分为四个等级：100级、10000级、100000级、300000级。洁净度级别尘埃最大允许数，个/m3微生物最大允许数≥0.5m≥5.0m沉降菌CFU/皿浮游菌CFU/m3100级350001510000级35000020003100100000级35000002000010500300000级105000006000015—国际标准比较USP32(209E)ISO14644EuGMPWHOGMP≥0.5m/M3≥0.5m/ft3(美国习惯分类)M3.5ISOClass5AA3500100M4.5ISOClass6BB353001000M5.5ISOClass7CC35300010000M6.5ISOClass8DD3530000100000洁净室的控制参数1.尘埃粒子和微生物：主要影响产品的纯度、交叉污染和无菌程度2.温度和相对湿度：主要影响产品工艺条件和细菌的繁殖条件、由操作舒适度带来的对产品质量的影响3.换气次数：影响洁净度和人员舒适度4.截面风速：影响洁净度和人员舒适度5.压差：影响洁净度6.照度：影响产品的工艺条件7.噪声：影响人员舒适度8.新风量：影响人员舒适度9.自净时间：代表系统的“恢复能力”对洁净室的测试换气次数（截面平均风速）温度相对湿度静压差噪声照度尘埃粒子（动态）浮游菌或沉降菌（动态）人员和物品的出入控制在洁净室内，所需员工应满足最小数量不得在洁净室内佩戴腕表和饰物、不得化妆所有的工作人员，包括与测试、维护有关的人员，应该定期接受与洁净室生产有关的培训，其中包含涉及到的卫生知识和基本微生物知识洁净室的测试人员应进行本专业的培训并获得相应资格后才能履行对洁净室测试的职责适宜的清洁消毒建议消毒剂轮换使用设备可以用喷剂进行消毒，定期对墙面、工作台面等进行消毒墙面、椅子及工作面的消毒，其方法同一般的无菌室灭菌剂擦拭法，但使用无纤维脱落的抹布或海绵使用的稀释容器事先应消毒从较重要的、洁净的地方向外或比较不干净处顺序擦拭为了避免一经擦过的地方再次受到污染，应始终朝着一个方向擦拭，而不要在同一个位置上来回擦必要时使用两个桶，一个盛灭菌剂，另一个则用于挤干抹布，防止抹布对灭菌剂的污染所有的容器上应明确标明内容物