邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一．实验目的和要求1、掌握紫外可见分光光度计的基本操作；2、掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法；3、掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；4、掌握标准曲线绘制及应用。二．实验原理邻二氮菲（1,10—邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe2+形成红色配位离子Fe2++3NNNN3Fe2+在pH=3~9范围内，该反应能够迅速完成，生成的红色配位离子在510nm波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1×104，反应十分灵敏，Fe2+浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。实验中，采用pH=4.5-5的缓冲溶液保持标准系列溶液及样品溶液的酸度；采用盐酸羟胺还原标准储备液及样品溶液中的Fe3+并防止测定过程中Fe2+被空气氧化。三．实验仪器与试剂1.752型分光光度计2.标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3.邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4.盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5.醋酸盐缓冲溶液6.50ml容量瓶7个7.5ml移液管4只8．1cm玻璃比色皿2个9.铁样品溶液四．实验步骤：1、标准系列溶液及样品溶液配制按照下表配制铁标准系列溶液及样品溶液编号1234567（标准铁溶液）1x10-3M标准铁溶液0.00ml1.00ml2.00ml3.00ml4.00ml5.00ml2.50ml10％盐酸羟胺溶液1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml0.15％邻二氮菲溶液5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml醋酸盐缓冲溶液5.00ml5.ooml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml说明以上溶液均用移液管移取至50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度并摇匀。系列标准铁溶液浓度00.02mol/ml0.04mol/ml0.06mol/ml0.08mol/ml0.10mol/ml-------2、吸收曲线绘制用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在各个波长处的吸光度，在坐标纸上以测定的吸光度为纵坐标，波长为横坐标，绘制吸收曲线，并从吸光曲线上找出最大吸收波长。测定波长480nm482nm484nm486nm488nm490nm492nm494nm496nm498nm吸光度0.6360.6370.6390.6410.6440.6520.6560.6560.6580.673测定波长500nm502nm504nm506nm508nm510nm512nm514nm516nm518nm吸光度0.6780.690.6920.6990.70.6820.6790.6710.6610.637测定波长520nm522nm524nm526nm528nm530nm532nm534nm536nm538nm吸光度0.6130.6010.5660.5340.5030.4680.4450.3960.3620.33选择的最大吸收波长为:508(nm)绘图如下：吸收曲线00.10.20.30.40.50.60.70.8470480490500510520530540550波长吸光度吸收曲线3、标准曲线制作在选定最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2至7号溶液的吸光度，在坐标纸上以吸光度平均值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标制图，绘制标准曲线。编号234567（样品溶液）吸光度A10.2360.4630.70.9361.1270.573吸光度A20.2360.4630.70.9361.1270.573吸光度A30.2360.4630.70.9361.1270.573A平均值0.2360.4630.70.9361.1270.573绘图如下：标准曲线y=11.275x+0.0159R2=0.998600.20.40.60.811.21.400.020.040.060.080.10.12浓度（mol/ml)吸光度系列1线性(系列1)实验数据处理：1.样品溶液中铁含量计算C读取值=（0.573-0.0159）/11.257=0.04952Cx=C读取值×50.00/2.50=0.49×20=0.99(mol/ml)=0.99x10-3(mol/L)2.摩尔吸光系数计算ε=(A2－A1)/(c2－c1)=(0.466—0.242)/(0.04×10-3—0.02×10-3)=11.275mL/(mol·cm)=1.1275x104L/(mol.cm)实验讨论：在本次实验中，比色皿在换装不同浓度的溶液时，必须用待测的溶液润洗至少三次，装入四分之三或五分之四左右，放入分光光度计样品室前，必须用吸收纸将表面擦拭干净，每更换一次比色皿要及时调零，等示数稳定后，再读取数据。我们组绘制吸收曲线时，最开始选择的吸收波长是502nm，但是经过我们重新实验，发现第二次数据和第一次数据完全不同，吸收波长也由502nm变为了508nm,可能是由于第一次实验操作不规范，再加上仪器的不稳定造成的。