实验一(生药学)

中药鉴定教研室刘薇中药鉴定常用实验技术、大黄的鉴定实验一内容提要显微镜的使用粉末制片法组织简图、粉末图的绘制法实验报告的格式大黄的鉴定目的要求：掌握粉末制片方法；掌握大黄的组织、粉末鉴别特征和理化鉴别方法。熟悉生物显微镜使用方法、显微作图方法及实验报告的书写格式。一、显微镜的使用显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。照明系统：包括光源和聚光器。光学放大系统：由物镜和目镜组成，是显微镜的主体。机械装置：用于固定材料和观察方便，包括载物台、推动器、调节器和物镜转换器等。普通生物显微镜光学显微镜的构造：使用显微镜的操作步骤及注意点观察前的准备工作正确拿放显微镜→检查各部件是否完整和正常→对各部件进行必要的清洁。低倍镜的操作方法调视野（对光）→装片→调节焦距（粗调节轮找到物象，细调节轮调节物象清晰）高倍镜的操作方法低倍镜下选择物像，移至视野中心，换转高倍镜，转动细调节轮使物象清晰。（若高、低倍镜视野中心不重合，需进行校正。）光源的调节调节反光镜（或直接调节光线的明暗）、升降聚光器、调节光栅等。注意事项养成双眼观察的习惯；观察标本先低倍后高倍；保持显微镜干燥、清洁。瞳距调节屈光调节二、粉末制片法•粉末的制备方法：粉碎→过筛→混合均匀备用细度：中药材通过药典4~5号筛（孔径0.17~0.25mm）中成药通过药典6号筛（孔径0.15mm）要求：样品具有代表性；全部过筛；混合均匀。•粉末制片一般装片：取粉末少许，用蒸馏水或甘油醋酸试液装片。可观察细胞中的不溶性物质如淀粉粒、脂肪油滴、色素颗粒等。凡含淀粉粒的粉末进行鉴定时，必须先按此法进行装片。水合氯醛处理装片：取粉末少许，用水合氯醛试液反复加热处理，然后滴加稀甘油封片。水合氯醛试液可除去细胞中的淀粉，油脂等，增加细胞壁的折光率，还能使萎缩的细胞壁膨胀，从而使细胞的形态更加清晰。粉末制片是鉴定中药材最常用的方法之一，简便快速，主要鉴别细胞的形态特征。三、显微图的绘制目的：补充文字记述的不足显微摄影：准确真实，但需设备，且主次不分、视野有限，使用局限。显微绘图：突出主要鉴别特征，可将所有特征集中表示，表达清晰，易于记忆。组织简图显微图的类型组织详图粉末图组织简图的绘制组织简图是用来表示在低倍镜下所见各种组织和某些特征的位置、分布情况和比例关系的组织构造图。用各种不同的符号代替各种组织和某些特征。观察简图能清晰地了解该器官组织构造的全貌。•绘制组织简图的一般原则：–一切结构均用线条来表示。–所有结构线条不能用尺或其他圆规或曲线板等工具代画，必须徒手作图，以表示生物的自然形态。–显示立体结构可用透视线条来表示。–各部位应先画出引线再注文字。图下需注明图的名称、部位和放大倍数。•徒手绘图法的步骤：–选择最典型的标本或结构。–仔细观察各部位的形状、结构和之间的比例关系。–用较淡的铅笔(2H)画出各部位的比例关系和轮廓草图，反复对照修改，再用较浓的铅笔(HB)绘出修改图。–画引线，注字。薄荷(茎)横切面简图1.表皮2.厚角组织3.皮层4.内皮层5.形成层6.髓部7.木质部8.韧皮部9.橙皮苷结晶粉末图的绘制粉末图是用来表示高倍镜下所见细胞及内含物的特征的详图。要求细胞的形状、壁的厚薄、纹孔和层纹等都要尽可能的绘清楚、准确，并将显微镜下观察的主要特征按类别画出来。番泻叶粉末图(10×40)1.表皮细胞及平轴式气孔2.非腺毛3.晶鞘纤维4.草酸钙簇晶图的注解：①在靠近各类组分图的附近标上番号；②图下注明图的名称、放大倍数；③按图中番号注字，番号下角用缩写符号“.”四、实验报告的书写格式实验次数及名称学生姓名年级及专业学号日期一、材料来源二、实验内容（根据所做实验，选好如下内容）1．性状鉴定：注意描述次序，主要鉴别特征或对比主要鉴别特征，文字要精简，重点要突出。2．显微鉴定组织：注意由外到内的观察和描述，各部的比例，结构特征及内含物的情况等。粉末：首先观察记录粉末的颜色、气味，有的还需注意质地。显微镜下需注意各组分的特征，如形状、颜色、大小、多少等，并绘图表示。3．理化鉴定：着重记录反应条件，反应中发生的现象及产生的结果。五、大黄的鉴定（一）材料来源：大黄：蓼科植物掌叶大黄RheumpalmatumL.的根及根茎（二）实验内容1.组织（根茎横切面）：注意韧皮部、形成层、木质部的特征，黏液腔的分布，详细观察髓部异型维管束的构造。韧皮部散有黏液腔，木质部导管稀少，髓部大，其内散生内韧式的异型维管束，射线呈星状射出。薄壁细胞含淀粉粒及大型草酸钙簇晶。2.粉末：黄棕色，气特异。①大型草酸钙簇晶，棱角多短钝。②大型的网纹导管，非木化或微木化（木化染色：间苯三酚+盐酸→红色）。③众多的淀粉粒，单粒呈圆球形或长圆形，脐点多星状，复粒由2～7分粒组成。3.理化鉴别（检查蒽醌类成分）①荧光试验：大黄乙醇浸液于滤纸上→45%乙醇扩散→365nm紫外光灯下观察不得显持久亮紫色荧光。②加碱试验：大黄粉末少许+加氢氧化钾（钠）试液→紫红色。③微量升华：粉末加热→由低温至高温收集升华物镜检→依次见菱形、针状、羽毛状黄色结晶→加碱溶解并显红色。作业1.记录大黄的组织、粉末特征，绘制大黄粉末图。2.记录大黄理化鉴别结果。