PCR仪操作说明

MastercyclerPersonalPCR仪操作手册1简介Eppendorf的MastercyclerPersonal是适用于所有分子生物学和生化实验室研究的PCR仪。样品温度在4-90度间快速可调（最大速度每秒3度）。设计有特殊的“离心管控制”模式，从而对装有不同体积溶液的不同离心管中的样本进行温度控制。加热槽为一通用模块，可适用5X5的微孔板、25个0.2ml的EppendorfPCR管、16个0.5ml薄壁的EppendorfPCR管或其他相应的试管，而无须更换模块。为避免样本蒸发浓缩，本仪器设计有可适应各种试管高度的热盖。本仪器易于操作，有完整的八线显示，并可连接打印机。MastercyclerPersonal是Perkin-Elmer公司授权许可生产的PCR仪。2安全警告3安装3.1包装一个包装内应含有以下物品：1台小型PCR仪1条主电源线1本操作指南1张个人存储卡1包0.2mlPCR管（100个）3.2装机安装时请确保通气孔通畅，四周有足够的空间散热；并请确保仪器下部无其他异物。搬动仪器时无须其他装置，可抓住仪器两侧将其提起。所需空间：宽18cm深：35cm高：25cm电源连接：1个防电击插座。如需连接打印机，则需用另一电源连接。3.3启动仪器拆除热盖上的胶条并取出热盖下的泡沫塑料。连接电源线。启动仪器前请核对用户电源是否与铭牌要求相符。连接和启动打印机的步骤见第9部分。4技术说明4.1仪器结构图1：前面观1热盖2热盖锁3显示与控制面板4个人存储卡读取器图2：侧面观图3：背面观1热盖2加热槽（此图中未显示）3通气孔4PC连接插孔5打印机连接插孔1通气孔2主电源开关3保险丝4主电源插孔5铭牌图4：显示与控制面板1编辑键2光标键3控制键4小数点和顺序颠倒标志键5显示屏4.2按键1、编辑键Opt—在运行过程中按opt键可显示程序运行的剩余时间—编程时选择温度指令（ramp、梯度、增量）Del—删除程序条，数据字母或重新设定参数：按住此键可删除整条信息Sel—选择程序指令—选择菜单信息—可选择字母（用±键决定正逆序）Ins—在程序编辑中插入程序条2、光标键▲►▼◄用于移动光标，显示为黑色方块。—选择某菜单时将光标移至该菜单，按Enter键确认—也可用于移入和改变间隔，字自动存储，无须Enter确认，可立即储存3、控制键Exit—退出当前菜单或返回更高一级菜单—启动程序后退出该程序的显示，可以回到编程状态Enter—调用光标选中的菜单功能—确认输入Start/Stop—直接启动FILES/Edit状态下的程序：若要启动其他程序须在“Start”菜单下进行—取消或中断程序4.3菜单结构及显示打开仪器后部的主开关。屏幕显示仪器名称和软件版本，随后显示主菜单。5菜单描述5.1主菜单（MAINMENU）Start启动程序菜单目录名子目录名运行中程序名时间热盖温度设定/实际温度FILES编辑OPTIONS系统设置Lid预热热盖Incubate温育大写字母标注的目录下有子目录，为方便查找，共有三种方法选择目录子目录，目录名或标题显示在屏幕左边，（1）用光标选择，按Enter确认；（2）用Sel选择，按Enter确认；（3）用内部位置号选择，按Enter确认。Exit键用于退出当前状态，连按数次可回到主菜单。完整的菜单结构为Start（1）FILES（2）——EditLoadStandardNewDeleteOPTIONS(3)------EditorPrinterGENERAL------ClockRemoteSoundEtc.VALLID(4)Incu(5)5.2启动（START）启动程序需在“START”菜单下进行。显示为进行水平（processinglevel）的程序可由直接按压“START/STOP”启动。“START”菜单下无子目录。选择“START”后以“ENTER”键确认，则进入该目录下，用光标选择所需启动的程序，按“ENTER”键确认，可启动此程序。5.3文件编辑（FILES）“FILES”菜单用于修改、下载、新建或删除某程序。5.3.1编辑（EDIT）用于修改已有的程序。被修改的程序或者已处于进行水平，或者可由“LOAD”菜单下载为进行水平的程序。这些程序可来源于主机存储器或个人存储卡。修改后的程序可在保存为新名称后通过按“START/STOP”键进行检测。该程序保存后在进行水平的程序不会被删除。注意：如果某一程序被修改而未被存于新文件名下，被启动时将有两个不同的程序具有相同的名称（其一存于仪器内存中，另一处于进行水平）。5.3.2下载（LOAD）用于调出已存的程序清单（包括仪器内存和个人存储卡中的程序）。选出的程序被下载到“EDIT”进行水平。如果使用者不保存原程序，则下载新程序后原程序被覆盖。5.3.3标准程序（STANDARD）随机储存一个名为“STANDARD”的样板程序，有新程序下载时该程序被覆盖。该程序可被用于模板进行修改从而编辑新的程序。5.3.4新建（NEW）“NEW”用于编辑新的程序。PCR仪缺省显示CNTRLBLOCK，Lid=0°，NOWAITAUTO，程序名自动起名为UNNAMED。5.3.5删除（DELETE）可从内存或个人程序卡上删除程序，屏幕上显示程序清单，用光标选中某程序后按Enter可删除该程序。5.4系统设置“OPTIONS”菜单用于定义程序编辑器、打印机、时间/日期等常用系统参数的设置。通过“SEL”键选择YES/NO，ON/OFF及其他设置。按“ENTER”键可退出该菜单。5.4.1编辑器（Editor）YES：屏幕上显示多种参数（温度增量、时间增量、RAMP、RAMP增量、梯度）NO：只显示设定温度和循环时间。5.4.2打印机（Printer）仅在连接打印机后方可进入。“PRINTOUTEDITOR”：选择“YES”时可打印处于“编辑”菜单下进行水平的程序。“PRINTPROTOCOL”：选择“ON”则在程序启动时打印出指令；在运行时打印每一完整的指令和时间。5.4.3常用系统设置CLOCKFormat：用Sel键选择24小时制/12小时制Time：当前时间，时：分：秒Date：当前日期，日/月/年REMOTE波特率：以“SEL”选择传输速率。SOUNDKeyclickON：敲击键盘有声响OFF：敲击键盘无声WarningON：报警时声音文字同时出OFF：报警时无声音ETCStartwithMAIN：接通电源后屏幕显示主菜单LAST：接通电源后屏幕显示上次关机前的菜单AutorestartYES：断电后如果电源在3分钟内重新接通，正在执行的程序会继续运行NO：程序运行时断电该程序终止。VALID…用于校准仪器。5.5热盖（LID）用于对热盖进行预热。5.6温育（INCUBATE）用于温育实验或预热加热槽。6操作6.1准备6.1.1加样加样槽适用于三种试管：25个0.2ml试管，16个0.5ml薄壁管（Eppendorf管）或一个5X5微孔板。为了使温度传递良好建议使用V型底的试管。试管应与加热槽紧密接触，并有耐120度高温的能力。6.1.2加样量温度控制可选择针对加热槽或样品。如果选择控制样品温度，本机要求样品加样量不超过100ul（针对0.5ml管）或50ul（针对0.2ml管和微孔板）。使用CNTRLTUBE指令，参数可调整至符合实际的加样量和试管型号。6.1.3加热热盖加样后盖上热盖，并根据使用的试管不同类型，把热盖锁在相应的位置上。因此不同类型的试管不能同时加盖，这种情况下要求使用油膜。使用热盖可防止试管内液体蒸发浓缩，样品不必用油膜覆盖。热盖温度可由程序自动控制（最大110度）或设置，另可设置WAIT/NOWAIT（是否等待热盖升温后在启动程序）指令。注意：不要触摸热盖内表面和加热槽表面，以免烫伤。6.2打开仪器打开仪器后面的主开关，屏幕显示仪器型号和软件版本及主菜单。6.3启动/停止程序处于进行水平的程序可直接按START/STOP键启动。启动其他程序时，用光标选中Start状态，按Enter确认。屏幕显示程序清单，光标停在刚执行过的程序名前，将光标移到要执行的程序前，按Enter可直接启动。在程序运行期间程序名和Running交替显示，主菜单上Start变成Stop。用Stop指令可在任意位置中止暂停或继续运行程序，Start/Stop键同样适用。如果程序设置为“CNTRLTUBE”，则在启动后需选择所用PCR管的大小、类型和管内容物的体积。6.4显示程序运行时间按压“opt”键可在程序运行时显示运行时间和程序结束时间，opt键只在程序运行时按压有效，在主菜单、其他菜单及子菜单状态下按压无效。6.5暂停程序的运行按Start/Stop键或调出Stop！…用Sel选择Pause…确认后程序中断。6.6结束暂停要想继续执行只需按Start/Stop键或调出Stop！，用Sel选择Resume确认。6.7终止程序按Start/Stop键或调出Stop，Enter确认后程序终止。6.8关断电源程序结束后按Exit键退回主菜单，关断电源即可。7编程内存中最多可存100个程序，程序存储数量与程序长度有关。使用“SEL”键选择字母和不同的编程语句。程序名由数字或字母定义（最多8位）。7.1程序指令7.1.1CNTRL控制加热槽或样品温度。参数设置可选BLOCK：设置温度与加热槽温度有关TUBE：仪器可自动根据试管型号和加样量大小调整温度使管内液体达到所设温度，因此程序启动后相关数据应立即输入。7.1.2LIDLID指定热盖温度，如果设0度则温度功能关闭。设置范围0-110度。参数可选：NOWAIT：程序直接启动与热盖温度无关WAIT：热盖温度达到预定值程序才可启动FIX：热盖温度与加热槽温度无关热盖升温持续到程序结束AUTO：如果室温保持22度5分钟以上，热盖自动停止升温另有六条高级指令（可通过“SEL”键选出或直接按固定的数字调出）。7.1.3T（亦可按1键）设定温度（范围4.0-99.0度，最小单位为0.1度），时间（范围0:00:01-9:59:59，最小单位为秒）。温度单位是摄氏度，时间顺序为小时、分钟、秒，可选指令：●TEMPRETUREINCREMENT：每个循环温度修整量。“+”表示升温，“-”表示降温，设置范围0.0-10.0度，最小输入单位0.1度。●TIMEINCREMENT：每个循环时间修整量。“+”表示时间增加，“-”表示时间减少，设置范围0:00:01-0:01:00，最小单位为1秒。●RAMP：加热/冷却的最大梯度。设置范围0.3-3.0度/秒，最小单位0.1度/秒。●RAMPINCREMENT：每个循环的梯度修整量。设置范围0.0-1.0度/秒，最小单位0.1度/秒。7.1.4HOLD（亦可按2键）指加热槽保持在指定温度不变。按下“ENTER”键可结束或继续执行程序。设置范围4.0-99.0度，最小单位0.1度。7.1.5PAUSE（亦可按3键）暂时中断程序，温度维持在暂停时的值。7.1.6GOTO（亦可按4键）跳转到另一程序行。其后跟循环的重复次数。程序行号1-40，重复次数1-99。7.1.7SOUND（亦可按5键）在显示程序暂停或程序结束时发出声音信号，允许重复次数为1-10声。7.1.8LINK（亦可按6键）跳转到内存的其他程序。执行该指令时，现运行的程序停止而开始一个新的程序。LINK指令最多调用5个程序。并且不能跳转到“Edit”方式下的程序及个人卡上的程序（但可由个人卡转接主机程序）。必须输入另一要调用的程序名（用Sel键输入），如果输入当前程序名将陷入死循环，此时只能用“Stop”终止。7.1.9END自动写在程序结尾关断加热槽和热盖温度调节，终止程序。7.2编制新程序7.2.1编程选择“FILES”方式下的“New”按“Enter”键调出。程序开始时要先设定加热槽和热盖温度：●根据屏幕提示，按Enter键调出温度控制状态，用Sel键选择TUBE或BLOCK，按Enter确认：●再按Enter选中LID，输入温