产品初始污染菌和微粒污染控制验证方案复习课程

产品初始污染菌和微粒污染控制验证方案初始污染菌和微粒污染控制验证方案1.目的通过设计试验确认XX半成品的储存环境和存放有效期。其可能存在的环节如下：（1）在内包装封口前初始污染菌是否满足控制要求（定期监控）；（2）等待灭菌的产品，密封严实存放在外包间，其初始污染菌随储存时间变化。2.适用范围本验证方案适用于本产品，通过试验研究，以确定在各种情况下的储存有效期。3.发放范围管理者代表、生产部和质量部等有关部门及人员。4.规范性引用文件《中华人民共和国药典》2015版附录微生物限度检查法5.组织和职责根据验证工作量的大小，本公司成立验证组，由公司管理者代表任组长，生产部、质量部、有关部门及人员任组员。验证小组职责：负责验证方案的起草、批准；负责验证的协调工作，以保证验证方案规定项目的顺利实施；负责验证数据结果的审核；负责验证报告的审批；负责发放验证证书；负责确定该项验证的再验证周期。5.1主责部门本方案的主责部门为公司管理者代表，其职责为:负责审批验证方案和验证报告，颁发验证证书。5.2相关部门本方案的相关部门为质量部，其职责为：按标准操作规程及验证方案进行各项确认，及时报告确认结果，形成验证报告；负责操作培训和现场监督。6.步骤和方法6.1计划及进度本验证由质量部提出完整的验证计划，经验证小组批准后实施，由质量部完成，整个验证活动分为两个阶段完成：运行确认(OQ)从年月日到年月日性能确认(PQ)从年月日到年月日6.2初始污染菌和微粒检测方法及可接受标准6.2.1抽样方法和抽样规律以每一个生产批为产品抽样批，随机抽取样品1片（长宽约5cm×2cm）记为1单位，在洁净条件下精确称重，并标记。需要临时或长期存放时间预计不超过30天（1个月），综合细菌的生长规律及可能存在的存放天数，其抽样检测的时间设计为存入后：第1天、第2天、第3天、第5天、第7天、第15天、第30天。6.2.2供试液制备1)取0.9%的生理盐水溶液10ml，盛于已灭菌的试管内；2)将取样依次投入试管，充分摇匀。6.2.3接种与培养1)取上述供试液1ml加入9ml生理盐水溶液，稀释成1:10；取上述稀释液2ml，分别注入2个已灭菌的平皿内(每个平皿注入1ml)；2)同时取1ml加入盛有9ml生理盐水溶液的试管中，稀释成1：100，再取此稀释液2ml，分别注入2个已灭菌平皿内(每个平皿注入1ml)；3)用已灭菌的营养琼脂培养基，融化待冷却到40-50℃，分别倾注15ml上述4个平皿，盖好上盖，并以顺时针或逆时针方向快速转动平皿，使供试液与培养基充分混匀。4)以上平皿做好标记，以免混淆。5)待培养基凝固后，将平皿移入37℃的培养箱中培养不少于48±2小时。6.2.4菌落计数1)当菌落数大于300CFU时，应将原液稀释成1：1000，即取供试液1ml加入0.9%的氯化钠溶液9ml中取得，然后重新接种及培养。2)当细菌生长呈片状、花点样菌落，该平皿不以计数。3)若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，以代表全平皿菌落数。4)计数方法平均数值×稀释倍数菌落数/质量（g）=质量a)首先选取平均菌落数在30～300之间的平皿，作为菌落总数测定的范围。b)如只有一个稀释级平均菌落数在30～300之间，则菌落数为该稀释级的菌落数乘以稀释倍数。c)如有两个相邻稀释级的平均菌落数在30～300之间，则先计算两稀释级菌落数的比值。高稀释级的平均平板菌落数×稀释倍数比值=低稀释级的平均平板菌落数×稀释倍数当比值≤2时，则以2个稀释级的平均菌落数均值报告。当比值＞2时，则以低稀释级的平均菌落数乘以稀释倍数报告。d)如各稀释级平均菌落数均在300以上，则按最高平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均在30以下，则按最低平均菌落数乘以稀释倍数报告。e)如各稀释级平均菌落数均不在30～300之间，则以最接近30或300的稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告。f)如各稀释级平均菌落数均无菌落生长或最低稀释级平均菌落数小于1时，应报告菌数为10个/g。g)如有3个稀释级平均菌落数均在30～300之间，则以后2级计算级间比值报告。h)菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告。大于100时，采用二位有效数字，在两位有效数值后面，应以四舍五入法计算。在报告菌落数为“不可计”时，应表明样品的稀释度。例：例次不同稀释度的平均菌落数两相邻稀释度菌数之比菌落总数个/g报告方式个/g10-110-210-31136516420-1640016000或1.6×10422760295461.63800038000或3.8×10432890271602.22710027000或2.7×1044不可计4650513-513000510000或5.1×105527115-270270或2.7×102i）总稀释倍数计算时应包括取样时的10ml，即已稀释10倍。6.2.5可接受标准初始污染菌和微粒控制值：≤100CFU/单位6.3验证内容6.3.1包装封口前的半成品生产批号初始污染菌检测均值（CFU/单位）结果评价结论：灭菌前初始污染菌主检：复检：日期：年月日6.3.2等待灭菌的半成品存放时间初始污染菌检测均值（CFU/单位）评价第1天第2天第3天第7天第15天第30天结论：半成品初始污染菌主检：复检：日期：年月日以上记录要三次生产批。7.批准结论验证组组长对验证报告进行审查、批准、并出具合格证明（合格验证报告）。8.再验证周期a）常规再验证周期一年；b)定期对初始污染菌和微粒的检测，定期汇总并进行趋势分析；