基因转录过程

第二节转录过程分为三个阶段：起始(initiation)延长(elongation)终止(termination)一、转录起始1.RNA聚合酶结合在转录模板的起始区域2.DNA双链解开，以一条链为模板，合成第一个磷酸二酯键(一)原核生物的转录起始RNAσ聚合酶pppGPPiN'TPN'-OH转录起始复合物(RNA聚合酶全酶－DNA－pppGpN'-OH)(二)真核生物的转录起始•反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，称为转录因子(transcriptionalfactor，TF）。•相应于RNA-polⅠ、Ⅱ、Ⅲ的TF，分别称为TFⅠ、TFⅡ、TFⅢ。•TFⅡ又分为TFⅡA、TFⅡB……等。TFⅡD是唯一能结合TATA盒的蛋白质。•真核生物的转录起始是在转录因子的协助下，RNA聚合酶辨认结合转录起始点上游的DNA序列(启动子)，生成起始复合物。TFIIFRNA聚合酶TFIIDTATADNATFIIATFIIBTFIIE转录前起始复合物二、转录延长转录泡(RNA-pol、DNA、RNA)转录泡（transcriptionbubble）：在转录延长过程中，由局部打开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA三者结合在一起的复合体，为空泡状结构，又称转录复合物。电镜下原核生物转录现象：转录未完成，翻译已开始进行。三、转录终止(一)原核生物的转录终止1.依赖ρ因子的转录终止用T4噬菌体DNA在试管内进行转录实验，转录产物比在细胞内转录出的要长。说明：①转录终止信号是可以跨越的；②细胞内某些因素有执行转录终止的功能。据此，69年,J.Roberts发现了能控制转录终止的蛋白质，定名为ρ因子。•因子是个同六聚体；•因子能结合RNA，与polyC的结合力最强；•因子还有ATP酶和解螺旋酶的活性。2.不依赖ρ因子的转录终止DNA模板上靠近终止处，有特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。特殊结构终止转录的机制：•发夹结构改变RNA聚合酶构象，使酶停止移动；•DNA、RNA各自形成自身双链使杂交体不稳定而分离；•3´－端一连串U，UA配对最不稳定，易从模板上脱落。(二)真核生物的转录终止