缺氧实验报告

实验报告一、实验目的：（1）学习复制动物缺氧病理模型的方法掌握不同缺氧类型主要的发病原因和机制。（2）观察不同类型缺氧时呼吸、皮肤粘膜颜色、活动的改变（3）了解机体功能、代谢特点与缺氧对机体影响的关系。二、实验动物：小鼠三、实验方法：(1)不同年龄小鼠对缺氧耐受性影响①取新生幼鼠一只，放入青霉素小瓶内，瓶口塞少量棉花以免成年鼠伤害。②将青霉素小瓶放入广口瓶内，再取一只成年小白鼠一同放入瓶中。③密闭瓶塞，计时。④观察小鼠在瓶内的活动、呼吸变化(2)低张性缺氧实验①选取两只体重相近的小鼠，用天平称重小鼠。②分别将两只小鼠投入钠石灰瓶和玻璃珠瓶内。③同时密闭瓶塞并开始计时。④密切观察小鼠在瓶内的活动度、呼吸、皮肤粘膜的颜色等变化。⑤小鼠死亡后进行尸检观察血液颜色的变化：先在试管中各加入5ml水备用；将小鼠仰卧位固定于手术台上，剪开小鼠胸部皮肤；用镊子提起剑突，剪断两侧肋骨，打开胸腔，剪破心脏；用滴管滴入2滴7%枸橼酸钠溶液；混匀后取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸馏水的试管内，立即用封口膜封闭管口；摇匀，观察试管内溶液的颜色。(3)亚硝酸钠中毒①取一只小白鼠，称重。小鼠尾剪断取对照血样。②抽取2%亚硝酸钠溶液（用量为每10克体重0.35毫升）。③给小鼠皮下注射亚硝酸钠，计时。④观察小鼠的活动度、呼吸、皮肤粘膜的颜色等变化。⑤小鼠死亡后进行尸检观察血液颜色的变化：先在试管中各加入5ml水备用；将小鼠仰卧位固定于手术台上，剪开小鼠胸部皮肤；用镊子提起剑突，剪断两侧肋骨，打开胸腔，剪破心脏；用滴管滴入2滴7%枸橼酸钠溶液；混匀后取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸馏水的试管内，立即用封口膜封闭管口；摇匀，观察试管内溶液的颜色。(4)一氧化碳中毒①取一只小白鼠，将其放入三角烧瓶内。小鼠尾剪断取对照血样。②盖上瓶塞，连接通气管，打开气囊阀门，向瓶内通入一氧化碳气体并计时。③观察皮肤粘膜颜色改变。④小鼠死亡后进行尸检观察血液颜色的变化：先在试管中各加入5ml水备用；将小鼠仰卧位固定于手术台上，剪开小鼠胸部皮肤；用镊子提起剑突，剪断两侧肋骨，打开胸腔，剪破心脏；用滴管滴入2滴7%枸橼酸钠溶液；混匀后取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸馏水的试管内，立即用封口膜封闭管口；摇匀，观察试管内溶液的颜色。(5)氰化钾中毒①取一只小白鼠，称重。小鼠尾剪断取对照血样。②抽取0.04%氰化钾溶液（用量为每10克体重0.2毫升），用棉球抵住针头，小心排出气泡和多余药液。③给小鼠腹腔注射氰化钾，计时。（针头插入后回抽看是否有血液，若有血液则拔出针头再穿刺）④观察小鼠的活动度、呼吸等变化。⑤小鼠死亡后进行尸检观察血液颜色的变化：先在试管中各加入5ml水备用；将小鼠仰卧位固定于手术台上，剪开小鼠胸部皮肤；用镊子提起剑突，剪断两侧肋骨，打开胸腔，剪破心脏；用滴管滴入2滴7%枸橼酸钠溶液；混匀后取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸馏水的试管内，立即用封口膜封闭管口；摇匀，观察试管内溶液的颜色。三、实验结果记录：表1不同年龄小鼠对缺氧耐受性影响新生鼠成年鼠活动（行为）生存时间呼吸稍有加快无大幅度活动1小时26分5分35秒出现明显腹式呼吸，呼吸加深加快，10分钟后开始有挣扎表现，于11分40秒死亡11分40秒表2低张性缺氧两小鼠的观察指标变化实验条件钠石灰瓶玻璃珠瓶呼吸变化先加深快后浅慢4分50秒呼吸频率加快皮肤、粘膜颜色血色行为改变生存时间暗红色暗红色呼吸频率增快躁动不安，呼吸急促趴下安静不动，急促呼吸18分14秒6分27秒腹式呼吸明显加深加快皮肤粘膜颜色逐渐加深，出现紫绀暗红色出现烦躁不安表现10分钟左右开始挣扎10分41秒呼吸频率减慢，出现大口呼吸11分10秒表3一氧化碳中毒时观察指标的中毒前后比较中毒前中毒后血液颜色淡红色樱桃红色皮肤粘膜颜色耳背灰白樱桃红色肝脏颜色淡红色樱桃红色表4亚硝酸盐中毒时观察指标的中毒前后比较中毒前中毒后血液颜色淡红色咖啡色皮肤粘膜颜色耳背灰白棕褐色肝脏颜色淡红色咖啡色表5氰化物中毒时观察指标的中毒前后比较中毒前中毒后血液颜色淡红色鲜红色皮肤粘膜颜色耳背灰白玫瑰红色肝脏颜色淡红色鲜红色表6不同类型缺氧时观察指标的结果比较呼吸变化皮肤黏膜颜色血液颜色生存时间低张性缺氧先变快后变慢青紫色（发绀）暗红色18分14秒CO中毒逐渐减慢樱桃红色樱桃红色1分27秒NaNO2中毒逐渐减慢棕褐色咖啡色11分12秒氰化物中毒先变快后变慢玫瑰红色鲜红色50秒左右四、讨论：（1）不同年龄小鼠对缺氧耐受性影响1）实验中可见成年鼠活动程度较大，故耗氧量更大，死亡时间更短。2）乳鼠出生前在母鼠子宫中，子宫为一相对缺氧环境，在相对缺氧的环境乳鼠对氧的利用能力增高：①细胞内线粒体数量代偿性增加②呼吸酶活性代偿性增强。此外乳鼠活动程度小，耗氧量较少，故死亡时间更久。（2）低张性缺氧实验1）小鼠在放入有玻璃珠的瓶中后，随着呼吸的进行，瓶中氧分压降低，小鼠体内血氧含量减少，引起小鼠产生代偿性反应，刺激颈动脉体和主动脉体的外周化学感受器，引起呼吸加深加快，肺泡通气量增加。随着实验的进行，瓶中的氧分压继续下降，二氧化碳分压上升，此时缺氧对呼吸中枢的抑制作用超过氧分压降低对外周化学感受器的兴奋作用，发生中枢性呼吸衰竭。表现为呼吸抑制，呼吸节律和频率不规则，肺通气量减少。到最后，二氧化碳分压继续升高，对小鼠产生二氧化碳麻醉，最后小鼠死亡。2）小鼠在放入有钠石灰的瓶中后（低张性缺氧），小鼠呼出的二氧化碳被钠石灰吸收，瓶中的氧分压比放玻璃珠的瓶中氧分压更低，二氧化碳的分压不上升。动脉血和静脉血中的氧合血红蛋白含量降低，而脱氧血红蛋白增多。所以，小鼠的唇尾颜色会变为青紫色（发绀）。其肝脏血液也因含有较多的脱氧血红蛋白而呈现暗红色。（3）亚硝酸钠中毒1）血红素中的二价铁在氧化剂的催化作用下氧化成三价铁，形成高铁血红蛋白，失去携氧能力。从而使血氧容量减少，以致动脉血氧容量减少，高铁血红蛋白含量增多。因为高铁血红蛋白呈棕褐色，所以亚硝酸钠中毒死亡的小鼠血液呈咖啡色。（4）一氧化碳中毒1）一氧化碳与血红蛋白的亲和力远大于氧与血红蛋白，故大部分血红蛋白与一氧化碳结合成为碳氧血红蛋白，碳氧血红蛋白释氧能力低。从而使血红蛋白的携氧能力下降，血氧容量减少，以致动脉血氧含量减少。所以一氧化碳中毒的小鼠体内的碳氧血红蛋白会累积很多，由于碳氧血红蛋白为鲜红色，所以小鼠的唇尾颜色和肝脏颜色也呈樱桃红色。2）通入一氧化碳不可过快，过快则使小鼠死亡时间缩短，皮肤粘膜看不到颜色变化。（5）氰化钾中毒1）氰化物中毒时，氰化物进入机体后分解出具有毒性的氰离子，抑制细胞内酶的活性，使呼吸链酶活力降低，同时氰离子与氧化型细胞色素中的三价铁结合，阻止其还原成二价铁，使细胞色素氧化还原酶系功能出现障碍，呼吸链的电子传递出现障碍，细胞的氧化磷酸化出现障碍，导致组织细胞用氧障碍，出现组织性缺氧。即血氧含量高但无法被组织细胞利用，所以血液呈鲜红色，皮肤粘膜为玫瑰红色。2）腹腔注射时针头插入后要回抽看是否有血液，若有血液则说明穿刺到血管，会导致小鼠过快死亡而观察不到现象，要拔出针头重新穿刺。五、小结：（1）新生幼鼠比成年鼠的缺氧耐受性更强。（2）吸入气氧分压过低可导致小鼠低张性缺氧死亡。（3）亚硝酸钠中毒可导致小鼠血液性缺氧死亡。（4）一氧化碳中毒可导致小鼠血液性缺氧死亡。（5）氰化钾中毒可导致小鼠组织性缺氧。