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一、操作规范1量程选择为确保更好的准确性和精度,建议移液量在吸头的20(10)%-100%量程范围内,建议适当使用量程范围如表1:表1移液枪建议有效使用范围量程(μL)有效范围(μL)100.5~10202~2010020~10020050~2001000200~100050001000~50002吸头安装把白套筒顶端插入吸头(无论是散装吸头还是盒装吸头都一样)。轻轻用力下压的同时把手中的移液枪按逆时针方向旋转180度。切忌用力过猛,更不能用剁吸头的方法来进行安装,因为那样做会对移液枪造成不必要的损伤。枪头卡紧的标志是略微超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰地密封圈。另外,吸取一定量的液体后垂直静置移液枪,如果没有液体往下滴也表明枪头密封良好。3容量设定正确的容量设定分为两个步骤:一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液枪垂直放置在眼前,平视,慢慢将容量值调至自己的预想值,从而避免视觉误差造成的影响。在容量设定时,从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时,需要超过1/3圈后再返回,因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。4预洗枪头从理论上讲,安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放2-3次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。注意:对常温样品,吸头润洗有助于提高准确性,但对于高温或低温样品,吸头润洗然而降低操作准确性。5吸液与放液5.1前进移液法用大拇指将按钮按下至第一停点,吸头浸入液体中(浸入倾斜度控制在20度之内,保持竖直为佳;浸入深度如表2),然后慢慢松开按钮回原点,松开时一定要保持平稳,速度适中。过快的吸液速度容易导致跳液现象,造成样品浸入套柄,带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。将枪头移出液体后在松开按钮。表2吸头浸入深度移液枪规格吸头浸入深度2μL和10μL1mm20μL和100μL2-3mm200μL和1,000μL3-6mm5,000μL和10,000μL6-10mm5.2反向移液法此法一般用于转移高粘度液体,生物活性液体,易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余液体。具体操作如下:先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点,接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点,取下有残余液体的枪头,弃之。为避免液体浸入枪体,不建议在满量程情况下进行此项操作。6卸掉吸头使用完毕的吸头打掉或手动卸除。使用过的吸头一定不能和未使用的新吸头混放,以免导致交叉污染。5ml的吸头须回收(电泳操作中吸取丙烯酰胺的吸头直接弃置),1ml及以下规格的吸头均为一次性使用。5ml枪头需经超声清洗,并用超纯水润洗干净,自然晾干或在烘箱中以不高于35℃的温度烘干。洗净干燥的枪头立即装入塑封袋中保存,避免在空气中长期放置染灰。移液枪使用完毕后需将量程调至最大值,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧,同时将移液枪垂直放置在移液枪架上,由于枪架位置有限,也可将带指钩的移液枪垂直挂在枪架附近的试剂架上。二、移液枪使用过程中的注意事项1)勿将移液枪浸入溶液中;2)转移挥发性液体,如醋酸、盐酸、乙醇、电泳染色液、脱色液等,请使用移液管;3)不可吸取温度过高(70℃)的液体,以免蒸汽浸入枪体腐蚀活塞;4)套有吸头的移液枪,不论吸头中是否有液体,请保持枪体垂直,请勿倾斜或平放甚至导致,谨防液体流入活塞室腐蚀移液枪活塞;5)移液枪操作时请保持姿势正确,不要时刻紧握移液枪,使用带指钩的移液枪有助于缓解手部疲劳,有可能的话经常换手操作;6)移液枪使用完毕后一定将量程调至刻度最大值,垂直挂在枪架上;7)如果发现枪体污染,或在操作过程中出现液体进入枪体的现象,请及时与仪器负责人员联系。
本文标题:移液枪使用规范(完整版)
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