DB34T 2407-2015 大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 高效液相色谱法

ICS67.040C53DB34安徽省地方标准DB34/T2407—2015大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定高效液相色谱法DeterminationofchlorantraniliproleresidueinricebyHPLC文稿版次选择2015-07-14发布2015-08-14实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T2407—2015I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所、农业部农产品质量安全风险评估实验室（合肥）、安徽科威农药重金属残留检测中心。本标准起草人：段劲生、高同春、王梅、孙明娜、董旭、褚玥、杨通、肖青青。DB34/T2407—20151大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了大米中氯虫苯甲酰胺残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于大米中氯虫苯甲酰胺残留量的测定。本标准的方法检出限为0.01mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分:总则与定义GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样用乙腈和盐酸混合溶液提取后，经中性氧化铝柱层析净化，用高效液相色谱紫外检测器检测，外标法定量。4试剂与材料4.1水为GB/T6682规定的一级水。。4.2乙腈。4.3丙酮。4.4石油醚：60～90℃。4.5乙腈：色谱纯。4.6浓盐酸。4.7氯化钠。4.8无水硫酸钠：用前在650℃下灼烧4h后备用。4.9中性氧化铝：100～200目，用前130℃处理4h，加水5％减活，备用。4.10盐酸溶液：2.0mol/L。4.11氯虫苯甲酰胺标准品：纯度≥99％。4.120.45μm微孔过滤膜4.13标准溶液——氯虫苯甲酰胺标准储备液:准确称取氯虫苯甲酰胺0.0100g，置于10.0mL容量瓶中，乙腈溶解并定容至刻度，配置成浓度为1000mg/L储备液，于0～5℃下避光保存。DB34/T2407—20152——氯虫苯甲酰胺标准工作液：取1000μg/mL氯虫苯甲酰胺储备液，用乙腈稀释，配成质量浓度分别为8.0mg/L、4.0mg/L、2.0mg/L、1.0mg/L、0.5mg/L和0.25mg/L的标准工作溶液，待用。标准工作液需现配现用。5主要仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。5.2旋转蒸发仪。5.3真空泵。5.4水浴恒温振荡器。5.5氮吹仪5.6电子天平：感量0.1g和0.1mg。6分析步骤6.1样品的采集、贮存及试样制备方法将不少于1000g大米（已脱壳）混匀，四分法取样，放入食品加工机粉碎，过20目筛，制成试样，放入试样瓶中密封，做上标记，并置于-20℃条件下保存，待测。6.2试样处理6.2.1提取准确称取25g（精确至0.1g）制备好的试样于锥形瓶中，向锥形瓶中加10mL盐酸溶液和20mL水浸泡20min，再加80mL乙腈（4.1）浸泡过夜，振荡提取1h，过滤，残渣用40mL乙腈（4.1）分两次洗涤，合并滤液于分液漏斗中，加5.0g氯化钠，振摇3min，静置分层，弃去下层水相，乙腈相经无水硫酸钠（4.7）干燥后，用旋转蒸发仪于35℃水浴下浓缩至近干，待柱层析净化。6.2.2净化在玻璃层析柱中依次装填2.0cm高无水硫酸钠、5.0g中性氧化铝（4.8）、2.0cm高无水硫酸钠，层析柱先用20mL石油醚+丙酮（1+1，体积比）预淋洗，弃去，然后转移样品液至柱上，用50mL石油醚+丙酮（1+1，体积比）洗脱，重复一次，收集洗脱液，用旋转蒸发仪于35℃水浴下浓缩至近干，氮吹仪用氮气吹干，乙腈（4.4）定容至2.0mL，过0.45μm滤膜，供高效液相色谱仪测定。6.3测定6.3.1高效液相色谱条件a)色谱柱：C18柱，5μm，250mm×4.6mm（内径）或相当者；b)柱箱温度：35℃；c)流动相：乙腈+水（1+1，体积比）；d)流速：0.8mL/min；e)检测波长：220nm；f)进样体积：10μL。6.3.2液相色谱测定DB34/T2407—20153取氯虫本甲酰胺标准工作溶液系列（4.12.2）及试样溶液各10μL，注入高效液相色谱仪进行分析，用外标法定量。6.4平行试验按以上步骤，对同一试样进行平行测定。6.5空白实验除不称取试样外，均按上述步骤测定。7结果计算试样中的氯虫本甲酰胺含量按公式（1）计算：mVCR....................................(1)式中：R——样品中氯虫本甲酰胺残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C——从标准曲线上得到的待测样液中氯虫本甲酰胺的浓度，单位为毫克每升（mg/L)；V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m——称取的试样量，单位为克（g）。注：计算结果应扣除空白值。8方法的准确度和精密度8.1准确度本方法在0.01mg/kg～1.0mg/kg之间添加浓度的回收率在80％～110％之间。8.2精密度本标准精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的，获得重复性和再现性的值是以95％的可信度来计算，本标准方法的精密度数据参加附录B。9高效液相色谱参考图见附录A。DB34/T2407—20154AA附录A（资料性附录）氯虫苯甲酰胺标准溶液色谱图（1.0mg/L）图A.1氯虫苯甲酰胺标准溶液色谱图（1.0mg/L）DB34/T2407—20155BB附录B（资料性附录）氯虫苯甲酰胺精密度数据表表B.1氯虫苯甲酰胺精密度数据表名称含量（mg/kg）重复性限r再现性限R含量（mg/kg）重复性限r再现性限R氯虫苯甲酰胺0.010.00050.00160.50.01980.0380_________________________________