您好,欢迎访问三七文档
当前位置:首页 > 行业资料 > 国内外标准规范 > DB34T 1376-2011 鸡蛋中氟苯尼考的残留测定-高效液相色谱法
ICS65.020.30B45DB34安徽省地方标准DB34/T1376—2011鸡蛋中氟苯尼考的残留测定—高效液相色谱法DeterminationofflorfenicolresiduesineggsbyHPLCmethod2011-03-16发布2011-04-16实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T1376—2011I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省畜牧兽医局提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:安徽省兽药饲料监察所(安徽省畜产品质量安全检测中心)。本标准主要起草人:李珲、许世富、汤春莲、陶小平、丁作坤、陈文帮。DB34/T1376—20111鸡蛋中氟苯尼考的残留测定—高效液相色谱法1范围本标准规定了鸡蛋中氟苯尼考检验的高效液相色谱法(HPLC)测定方法。本标准适用于鸡蛋中氟苯尼考残留的定量检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样3试样制备按GB/T14699.1抽取有代表性的不少于500g的鸡蛋样品,经匀浆后装入磨口瓶中在-18℃冰箱保存备用。4原理试样中残留的氟苯尼考经乙酸乙酯提取,正己烷脱脂,高效液相色谱仪测定,外标法定量。5试剂和材料除非另有说明,本法所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的二级水。5.1氟苯尼考标准品:纯度≥98%。5.2甲醇:色谱纯。5.3乙酸乙酯。5.4正己烷。5.5氢氧化铵:25%~28%。5.6无水硫酸钠:经300℃灼烧4h,置于干燥器中备用。5.7流动相:甲醇:水(40:60)。5.8聚丙烯离心管:50mL,1.5mL。5.9比色管:50mL,具塞。5.10梨形瓶:25mL。5.11滤膜:0.45μm,无机相。DB34/T1376—201125.12氟苯尼考标准储备液(1mg/mL):准确称取氟苯尼考标准品100mg,用甲醇稀释至100mL,摇匀,-18℃保存,有效期90d。5.13氟苯尼考工作液(10μg/mL):准确移取(5.12)中氟苯尼考标准储备液1.0mL,用甲醇稀释配制成100mL,摇匀,-4℃保存,有效期30d。5.14氟苯尼考标准溶液:取氟苯尼考工作液(5.13)适量,分别用流动相(5.7)稀释为0、20、50、100、200、400ng/mL的标准溶液,摇匀,4℃保存,有效期7d。6仪器和设备6.1高效液相色谱仪,配置二极管阵列检测器或紫外检测器。6.2离心机,转速不低于4000r/min。6.3振荡器。6.4涡旋混合器。6.5分析天平:感量0.0001g,0.01g。6.6超声波清洗器。6.7组织匀浆机。6.8旋转蒸发仪。7测定步骤7.1试样提取称取均质后的试样5g(精确至0.01g),置于50mL聚丙烯离心管中,依次加入30mL乙酸乙酯(5.3),0.9mL氢氧化铵(5.5),5g无水硫酸钠,振荡提取30s,以4000r/min离心5min,上清液转移至50mL比色管中,用乙酸乙酯定容至刻度,摇匀后取10mL乙酸乙酯提取液到25mL梨形瓶中,45℃水浴中旋转浓缩至干。7.2试样净化梨形瓶中的残渣用3mL水溶解,超声5min,加入3mL正己烷(5.4)涡旋混合30s,静置分层,弃掉上层的正己烷,再加3mL正己烷(5.4)涡旋混合30s,静置分层,移取1mL水相于1.5mL的聚丙烯离心管中,以8000r/min离心5min,经0.45μm滤膜过滤,供高效液相色谱仪分析。7.3色谱测定色谱柱:C18(4.6×250mm,5μm),或相当者。柱温:40℃。进样体积:20μL。流速:1.0mL/min。检测波长:365nm。流动相:甲醇-水(40:60)。7.4上机测定DB34/T1376—20113取适量试样溶液和相应浓度的标准溶液,作单点或多点校准,以色谱峰面积积分值定量。标准溶液及试样液中氟苯尼考的相应值均在仪器检测的线性范围内,标准溶液高效液相色谱图见附录A中图A.2。8结果计算按照下式计算试样中各种药物的含量:1000mAs1000VCsAX×××××=.................................(1)式中:X——试样中各种药物的含量,单位为毫克每千克(mg/kg);A——试样溶液对应的色谱峰面积响应值;As——标准溶液对应的色谱峰面积响应值;V——定容体积,单位为毫升(mL);Cs——标准溶液的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);m——试样质量,单位为克(g)。平行测定结果用算术平均值表示,结果保留三位有效数字。9检测方法灵敏度、准确度、精密度9.1灵敏度本方法在鸡蛋中的检出限为20μg/kg。9.2准确度本方法在添加浓度为80μg/kg添加水平的回收率均为70%~110%。9.3精密度本方法的批内变异系数CV%≤10%,批间变异系数CV%≤15%。DB34/T1376—20114AA附录A(资料性附录)色谱图A.1空白鸡蛋样品溶液色谱图图A.1空白鸡蛋样品溶液色谱图A.2标准物质溶液色谱图图A.2标准物质溶液色谱图DB34/T1376—20115A.3空白鸡蛋中添加标准物质溶液色谱图图A.3空白鸡蛋中添加标准物质溶液色谱图_________________________________
本文标题:DB34T 1376-2011 鸡蛋中氟苯尼考的残留测定-高效液相色谱法
链接地址:https://www.777doc.com/doc-7670956 .html