DB22T 2780-2017 青贮饲料发酵品质分级技术规程

ICS65.120B46备案号：59144-2018DB22吉林省地方标准DB22/T2780—2017青贮饲料发酵品质分级技术规程Gradingtechnicalregulationforsilagefermentationquali2017-12-11发布2018-04-01实施吉林省质量技术监督局发布DB22/T2780—2017I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。本标准起草单位：吉林大学。本标准主要起草人：王鹏、唐鸿宇、丁雪梅、张嘉保、陈承祯、房恒通、赵云、史旭东、沈景林。DB22/T2780—20171青贮饲料发酵品质分级技术规程1范围本标准规定了青贮饲料发酵品质评定的术语和定义、取样、样本处理、检测方法、发酵品质分级和发酵品质分级判定。本标准适用于以牧草、饲料作物以及农作物副产品等为原料调制的青贮饲料发酵品质分级。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6432-1994饲料中粗蛋白测定方法GB/T6435-2014饲料中水分的测定NY/T2129-2012饲草产品抽样技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1青贮饲料silage以新鲜或半干的牧草、饲料作物及农作物副产品等为原料，在厌氧条件下利用发酵原料表面附着的乳酸菌发酵，或者在外源添加剂的作用下促进或抑制微生物发酵，调制出的具有特殊芳香气味的饲料。3.2挥发性脂肪酸volatilefattyacid青贮饲料中由微生物发酵产生的乙酸、丙酸、丁酸及其它六碳以下的短链脂肪酸。3.3氨态氮ammonianitrogen青贮原料的蛋白质在发酵过程中分解产生的具有挥发性质的以氨形式存在的小分子含氮物质。3.4总氮totalnitrogen青贮饲料的总含氮量。4取样取样方法按照NY/T2129-2012规定执行。5样本处理DB22/T2780—201725.1青贮浸提液制备取新鲜青贮饲料样品20g，加入180mL蒸馏水，打碎匀浆。浆液经4层纱布过滤后，再经滤纸过滤，滤出液置于4℃冷藏24h后即为青贮浸提液。5.2风干样本制备取新鲜青贮饲料样品100g，60℃条件下连续烘干72h，回潮24h。6检测方法6.1含水量含水量按照GB/T6435-2014规定执行。6.2总氮量总氮量按照GB/T6432-1994规定执行。6.3氨态氮含量氨态氮含量的测定方法按照附录A。6.4挥发性脂肪酸含量挥发性脂肪酸含量的测定方法按照附录B。7发酵品质分级发酵品质综合分值按公式（1）计算。CBAX.....................................(1)式中：X——发酵品质综合分值；A、B、C——按表1取值。表1青贮饲料发酵品质评定指标和分级挥发性脂肪酸含量（鲜重%）氨态氮占总氮比例（%）乙酸+丙酸含量丁酸及六碳以下脂肪酸含量（%）分数（A）（%）分数（A）（%）分数（B）（%）分数（C）（%）分数（C）0.0～5.05014.0～14.2240.00～0.20100.000～0.012400.325～0.337145.1～5.54914.3～14.4230.21～0.3990.013～0.024390.338～0.349135.6～6.04814.5～14.7220.40～0.5280.025～0.037380.350～0.362126.1～6.54714.8～14.9210.53～0.6570.038～0.049370.363～0.374116.6～7.04615.0～15.2200.66～0.7860.050～0.062360.375～0.387107.1～7.54515.3～15.4190.79～0.9150.063～0.074350.388～0.39997.6～8.04415.5～15.7180.92～1.0440.075～0.087340.400～0.4128DB22/T2780—20173表1（续）挥发性脂肪酸含量（鲜重%）氨态氮占总氮比例（%）乙酸+丙酸含量丁酸及六碳以下脂肪酸含量（%）分数（A）（%）分数（A）（%）分数（B）（%）分数（C）（%）分数（C）8.1～8.54315.8～15.9171.05～1.1730.088～0.099330.413～0.42478.6～9.04216.0～16.2161.18～1.3020.100～0.112320.425～0.43769.1～9.54116.3～16.4151.31～1.4910.113～0.124310.438～0.44959.6～10.04016.3～16.714≥1.5000.125～0.137300.450～0.462410.1～10.43916.8～16.9130.138～0.149290.463～0.474310.5～10.73817.0～17.2120.150～0.162280.475～0.487210.8～10.93717.3～17.4110.163～0.174270.488～0.499111.0～11.23617.5～17.7100.175～0.18726≥0.500011.3～11.43517.8～17.990.188～0.1992511.5～11.73418.0～18.280.200～0.2122411.8～11.93318.3～18.470.213～0.2242312.0～12.23218.5～18.760.225～0.2372212.3～12.43118.8～18.950.238～0.2492112.5～12.73019.0～19.240.250～0.2622012.8～12.92919.3～19.430.263～0.2741913.0～13.22819.5～19.720.275～0.2871813.3～13.42719.8～19.910.288～0.2991713.5～13.726≥20.000.300～0.3121613.8～13.9250.313～0.324158发酵品质分级判定青贮饲料发酵品质按表2分级。表2青贮饲料发酵品质分级标准发酵品质分值优质80分≤X≤100分中等60分≤X＜80分劣质0分≤X＜60分DB22/T2780—20174AA附录A（规范性附录）氨态氮含量的测定方法A.1试剂A.1.1硼酸缓冲液（pH9.5）0.2mol/L的硼酸钠溶液和0.1mol/L的氢氧化钠溶液按体积4:1比例混合后，并将pH值调节至9.5。A.1.22%硼酸乙醇溶液将20g硼酸（分析纯）溶于800mL无水乙醇（分析纯）后，用蒸馏水定容至1L。A.1.30.01mol/L盐酸溶液配制0.01mol/L盐酸溶液，并用0.01mol/L标准氢氧化钠溶液对其标定。A.1.4甲基红溴甲酚绿混合指示剂A.2测定步骤取青贮浸提液2mL和硼酸缓冲液10mL加入凯氏定氮蒸馏装置。向三角瓶内加入2%硼酸乙醇溶液5mL和3滴～4滴甲基红溴甲酚绿混合指示剂后，将三角瓶接入凯氏定氮装置的冷却管处，要求冷却管前端进入三角瓶液面下。蒸馏7min后，将冷却管离开液面，再蒸馏2min（若蒸馏液不满50mL时，应使蒸馏液达到50mL为止）。蒸馏结束后，用0.01mol/L标准盐酸溶液对蒸馏液进行滴定。A.3计算方法氨态氮含量按公式A.1进行计算。10001001001802114.0%AWABFV.....................(A.1)式中：V——氨态氮含量，单位为鲜样的质量百分比（%）；F——用0.01mol/L氢氧化钠标准溶液滴定0.01mol/L盐酸滴定液的滴定系数；B——滴定值，单位为毫升（mL）；A——青贮饲料样品质量，A=20，单位为克（g）；W——青贮饲料的水分含量，单位为百分比（%）。BDB22/T2780—20175附录B（规范性附录）挥发性脂肪酸含量的测定方法B.1试剂B.1.1高氯酸，色谱纯。B.1.2超纯水。B.2高效液相色谱（HPLC）条件设定B.2.1色谱柱ShodexRspakKC-811S-DVBgelColumn30mm×8mm。B.2.2检测器紫外检测器，检测波长210nm。B.2.3流动相3mmol高氯酸。B.2.4检测条件流速为1mL/min。柱温为50℃。检测波长为210nm。进样量为5μL。B.3测定步骤B.3.1样品制备将青贮浸提液4500r/min离心15min，将离心后上清液经0.22μm微孔滤膜过滤，制成待测样品。B.3.2建立挥发性脂肪酸标准曲线分别配制浓度为0.5mg/mL、1mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL和10mg/mL的乙酸、丙酸、丁酸和戊酸混合标准溶液，根据色谱图峰面积和浓度的正比关系建挥发性脂肪酸标准曲线。B.4样品检测将制备的待测样品注入HPLC进样器后进行检测。B.5计算方法挥发性脂肪酸含量按公式B.1进行计算。DB22/T2780—20176102010020180MX............................(B.1)式中：X——挥发性脂肪酸含量，单位为鲜样的质量百分比（%）；——样液浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；M——样品的水分含量，单位为百分比（%）。_________________________________