DB50T 1363-2023 水质 四环素类抗生素的测定 液相色谱—串联质谱法

ICS13.060.01CCSZ10DB50重庆市地方标准DB50/T1363—2023水质四环素类抗生素的测定液相色谱—串联质谱法2023-02-20发布2023-04-20实施重庆市市场监督管理局发布学兔兔—2023I目  次前  言.............................................................................................................................................................II1范围.................................................................................................................................................................12规范性引用文件.............................................................................................................................................13术语和定义.....................................................................................................................................................14方法原理.........................................................................................................................................................15干扰与消除.....................................................................................................................................................16试剂和材料.....................................................................................................................................................17仪器和设备.....................................................................................................................................................28样品.................................................................................................................................................................29分析步骤.........................................................................................................................................................310结果计算与表示...........................................................................................................................................511精密度和正确度...........................................................................................................................................612质量保证和质量控制...................................................................................................................................713废弃物的处理...............................................................................................................................................7附录A（规范性）方法的检出限和测定下限...........................................................................................8附录B（资料性）方法的精密度和正确度...............................................................................................9学兔兔—2023II前  言本文件按照GB/T1.1－2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由重庆市生态环境监测中心提出。本文件由重庆市生态环境局归口并组织实施。本文件主要起草单位：重庆市生态环境监测中心。本文件主要起草人：张晓岭、郑璇、李新宇、张文斌、邹家素、李莉、李晓、张君、蹇川、刘敏、汪小艳、邹素兰、郭志顺、孙静、熊强、刘海立、肖霏。学兔兔—20231水质四环素类抗生素的测定液相色谱—串联质谱法1范围本文件规定了液相色谱-串联质谱法对水中5种四环素类抗生素进行测定的方法。本文件适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中四环素、土霉素、金霉素、甲烯土霉素、强力霉素等5种四环素类抗生素的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。HJ91.1污水监测技术规范HJ91.2地表水环境质量监测技术规范HJ164地下水环境监测技术规范3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4方法原理水中的四环素类抗生素经固相萃取柱富集，用液相色谱-串联质谱分离检测。根据保留时间和特征离子峰定性，内标法定量。5干扰与消除金属离子与目标化合物能形成络合物，使固相萃取效率降低，可向水样中加入乙二胺四乙酸二钠抑制络合物的形成。6试剂和材料警告：本方法所使用的有机溶剂对人体健康有害，试剂配制和样品前处理过程应在通风橱内进行，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服。6.1除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的超纯水。6.2氢氧化钠（NaOH）：分析纯。6.3盐酸（HCl）：1mol/L，分析纯。6.4甲醇（CH3OH）：农残级或等同规格。学兔兔—202326.5甲酸（HCOOH）:色谱纯或等同规格。6.6乙二胺四乙酸二钠（Na2EDTA）：分析纯。6.7甲酸溶液（0.1%）：取1ml甲酸（6.5）溶于1000ml实验用水中。6.8甲酸/甲醇溶液：取95ml甲酸溶液(6.5))和5ml甲醇（6.4）混合，摇匀。6.9标准贮备液：ρ=1.00g/L可直接购买有证标准溶液，也可用标准物质配制，标准物质纯度大于99.0%，用甲醇（6.4）溶解，贮备液在-10℃以下冷冻、避光保存不超过6个月或参照制造商的产品说明。6.10混合标准中间液：ρ=100μg/ml移取适量5种四环素类抗生素标准贮备液（6.9）按需要用甲醇（6.4）稀释，中间液于-10℃以下冷冻、避光保存不超过1个月。6.11混合标准使用液：ρ=1.00μg/ml（参考浓度）将四环素类抗生素混合标准中间液（5.7）按需要用甲醇（5.1）稀释，-10℃以下冷冻、避光保存不超过4天。。6.12内标贮备液：ρ=1.00g/L内标:四环素-D6（Tetracycline-D6）。可直接购买有证标准溶液，也可用标准物质溶于甲醇（6.4）。贮备液在-10℃以下冷冻、避光保存不超过6个月或参照制造商的产品说明。6.13内标中间液ρ=100μg/ml将内标贮备液（6.12）按需用甲醇（6.4）稀释，-10℃以下冷冻、避光保存不超过1个月。6.14内标使用液：ρ=10.0μg/ml（参考浓度）将内标中间液（6.13）按需要用甲醇（6.4）稀释，-10℃以下冷冻、避光保存不超过4天。6.15固相萃取柱：填料为二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物（HLB）或同等柱效的萃取柱，规格为6ml/150mg。6.16滤膜：0.22μ和0.45μm玻璃纤维聚膜或其他材质等效滤膜。6.17氮气：纯度≥99.99%。6.18氩气：纯度≥99.99%。7仪器和设备7.1液相色谱/串联质谱仪：配有电喷雾离子化源(ESI)。7.2色谱柱：C18柱或等效反相高效液相色谱柱，参考规格为100mm×2.1mm1.9µm。7.3浓缩装置：K-D浓缩器或氮吹浓缩仪等性能相当的设备。7.4固相萃取装置：自动或手动，流速可调节。7.5一般实验室常用仪器。8样品8.1采集与保存参照HJ91.1、HJ91.2和HJ164的相关规定采集样品于4000ml磨口棕色玻璃瓶中，水样应充满采样瓶，不留液上空间。样品采集后应尽快进行分析。如暂不能分析，应在0℃～4℃避光保存，2天内完成萃取，4天内完成分析。8.2样品制备学兔兔—20233将固相萃取柱（6.15）固定在固相萃取装置(7.4)上，分别用10ml甲醇(6.4)和10ml实验用水活化，保证小柱柱头浸润。水样经0.45μm滤膜(6.16)过滤，取1000ml水样，加入1gNa2EDTA（6.6），用氢氧化钠（6.2）和盐酸（6.3）调节pH值为至6.0，水样以低于10ml/min（约3滴/秒～4滴/秒）的流速通过小柱，用10ml实验用水洗涤小柱，用氮气（6.17）吹干小柱，再用10ml甲醇(6.4)洗脱，收集洗脱液于洁净试管中，洗脱液经浓缩装置（7.3）浓缩至干，加入内标使用液（6.14）5.00μl，用甲酸/甲醇溶液（6.8）定容至1ml，经0.22μm滤膜（6.16）过滤，置于样品瓶中，待测。当样品体积为1000ml，浓缩后定容体积为1.0ml，进样体积为10μl，5种四环素的检出限为2ng/L，测定下限为8ng/L，详见附录A。8.3空白样品的制备以实验用水代替样品，按照样品制备（8.2）相同操作步骤，制备直接进样法空白样品。9分析步骤9.1