第四篇 实验诊断 第十章 其他检测

配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。作者:岳保红单位:郑州大学第一附属医院第十章其他检测目录配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。第二节基因诊断第三节流式细胞术及其临床应用第一节染色体检测第四节床旁检测配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。重点难点熟悉了解掌握掌握基因诊断的含义、分子杂交技术、聚合酶链反应、流式细胞术的定义。基因诊断、流式细胞术、染色体核型分析在临床中的应用。POCT的概念和临床应用。配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。染色体检测第一节配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）一、染色体检查、染色体命名和书写方法1.染色体检查将待分析的细胞进行短期培养后，经过特殊制片和显带技术，在光学显微镜下观察分裂中期的染色体，确定染色体的数目及结构是否发生畸变，是确诊染色体病的基本方法染色体检查的标本除常用外周血外还可以用骨髓细胞、皮肤细胞、黏膜和羊水中的细胞等配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）2.染色体命名根据人类细胞遗传学命名的国际体制（ISCN），人类46条染色体按其长短和着丝粒的位置编为A～G7组，包括1～22号及X和Y染色体。男性为46，XY；女性为46，XX根据各染色体上显带特点，将染色体划区分布，p表示短臂，q表示长臂。“2P35”则表示2号染色体短臂3区5带一、染色体检查、染色体命名和书写方法配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）3.核型分析及其书写核型书写有统一格式，其书写顺序为：染色体数目、性染色体、染色体异常。t表示易位：inｖ表示倒位，iso或i表示等臂染色体，ins表示插入，del表示缺失，r表示环状染色体。“-”表示丢失，“+”表示增加等，第一括号内是累及染色体的号数，第二括号内是累及染色体的区带，其中p表示短臂，q表示长臂。一、染色体检查、染色体命名和书写方法配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）二、染色体异常及染色体病1.染色体异常包括染色体数目异常和结构异常。2.根据先天性和获得性分为先天性和获得性染色体异常。3.根据常染色体和性染色体分为常染色体病和性染色体病。配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）病名染色体变化频率主要症状常染色体异常Down综合征＋211/1000智能障碍、短头Edwards综合征+181/12000发育障碍、小头Patau综合征+131/5000小头、小眼球，兔唇性染色体异常Turner综合征XO，xpXO/XX1/10000矮小、性发育不全Klinefeter综合征XXY1/1000女性样乳房、小睾丸YY综合征XYY1.5/1000身材特别高、睾丸功能轻度障碍先天性染色体病病例二、染色体异常及染色体病配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。基因诊断第二节配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）一、基因诊断的含义基因诊断是在基因水平上对疾病或人体的状态进行诊断。它是以遗传物质（如DNA或RNA）为检查对象，利用分子生物学技术，通过检查遗传物质结构或表达量变化与否来诊断疾病的方法。配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。内容评价基因突变检测如点突变、基因片段的缺失或插入、基因重排等不同类型基因突变的检测基因连锁分析临床的一些疾病的致病基因尚不清楚，很难用基因突变的检测诊断，对这些遗传疾病采用基因连锁分析基因表达分析如mRNA拷贝定量检测及mRNA长度分析等。mRNA检测在基因表达水平上为基因功能是否正常提供了直接依据病原体诊断外来入侵病原微生物遗传物质的检测基因诊断的主要内容诊断学（第9版）一、基因诊断的含义配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）二、基因诊断在诊断学中的地位传统的疾病诊断方法：主要是以疾病的表观改变为依据，不能及时作出明确的诊断。基因诊断：病因的诊断，既特异又灵敏。（1）可以揭示尚未出现症状时与疾病相关的基因状态；（2）可以对表观异常不明显或不特异的携带者及某种疾病的易感者做出诊断和预测；（3）对确定有遗传疾病家族史的个体或产前的胎儿是否携带致病基因的检测具有指导意义。配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）三、基因诊断的常用技术（一）核酸分子杂交技术1.核酸分子杂交：两条互补单链核酸（DNA或RNA）在一定条件下按碱基互补原则退火形成双链的过程。2.分子杂交方法的共同点（1）应用了核酸序列的复性原理。（2）采用了标记探针：同位素或非同位素标记的短片段特异DNA或RNA。配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。方法评价Southern印迹杂交一种特定检测DNA片断的方法。Southern印迹的转印方法有毛细管虹吸印迹法、电转法、真空转移法临床上主要用于进行疾病的RFLP连锁分析、基因缺失诊断Northern印迹杂交一种研究RNA的方法，可用于测定细胞的总RNA或mRNA分子量的大小斑点杂交一种快速、简便、既可检测DNA又可检测RNA的方法，可同时检测多个样品，既可进行定性还可以进行半定量原位杂交（ISH）在保持细胞基本形态的情况下，用同位素或非同位素标记的探针与细胞内的DNA或RNA进行杂交。可同时检测多种DNA或RNA的情况原位杂交由于是原位检测，因此在对特定DNA或RNA进行检测的同时还可对其进行细胞及基因组内定位常用的核酸分子杂交技术与评价诊断学（第9版）三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（二）DNA测序1.DNA测序：测定DNA一级结构2.临床意义（1）DNA测序能直观地反映出DNA序列的变化（2）是诊断未知突变基因的最直接的方法（3）在遗传病和肿瘤的诊断、法医学的鉴定中具有非常重要的意义三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。方法评价双脱氧链终止法目前应用最多的快速测序技术化学降解法优点是模板不需体外酶促反应，只要末段标记的DNA片段，其缺点是方法复杂费时，末段标记比活性低“下一代”测序技术采用自动化测序仪进行，结果清晰、准确、分辨率高，大大提高了测序的速度和测序的功能DNA序列测定常用方法与评价诊断学（第9版）三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（三）聚合酶链反应1.聚合酶链反应（PCR）是利用DNA聚合酶（如：TaqDNA）在体外催化一对引物间的特异DNA片断合成的基因体外扩增技术。反应特异性强，灵敏度高。2.临床意义（1）病原体DNA的检测、肿瘤微量残留细胞的检出、遗传病的基因诊断，法医学上嫌疑人或个体遗传物质的鉴定等。（2）应用RT-PCR还可对RNA病毒如丙型肝炎病毒和待检基因的表达量进行检测。三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（四）连接酶链反应1.连接酶链反应（LCR）是一种新的DNA体外扩增和检测技术，主要用于点突变的研究及靶基因的扩增。2.临床意义LCR法可以进行单碱基遗传病多态性的快速筛选、单碱基遗传病的产前诊断、微生物亚种和亚型的鉴别、多态性的分析、法医学中个体DNA的准确鉴别。三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（五）单链构象多态性分析1.单链构象多态性（SSCP）分析是一种分析突变基因的方法。2.临床意义SCP多与PCR技术联用（PCR-SSCP）检测基因突变，提高了基因突变检测的灵敏性，现已广泛用于遗传病及肿瘤基因的分析。三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（六）限制性片段长度多态性分析1.限制性片段长度多态性（RFLP）分析是限制性内切酶、核酸电泳、印迹技术、探针－杂交技术的综合应用。2.临床意义（1）广泛地应用于遗传病的连锁分析，（2）还可用于基因组同源性分析以及个体识别。三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（七）单核苷酸多态性（SNP）分析内容评价密度高在基因组中的分布较微卫星标记广泛，可以在任何一个待研究基因的内部或附近提供一系列标记具有代表性某些位于基因内部的SNP有可能直接影响蛋白质的结构或表达水平，其本身可能就是疾病遗传机制的候选改变位点，可能代表疾病遗传机理中的某些作用因素遗传稳定性具有更高的遗传稳定性，尤其是处于编码区的SNP（cSNP）自动化分析由于SNP是双等位基因标记，容易进行自动化批量检测，分析也相对简单SNP的特性三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（八）基因芯片技术【原理】将大量已知的寡核苷酸分子固定于支持物上，然后与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的数量基因芯片技术集成了探针固相原位合成技术、照相平板印刷技术、高分子合成技术、精密控制技术和激光共聚焦显微技术，使基因芯片具有微型化、集约化和标准化的特点，实现了对靶基因的快速检测三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）应用评价优生优育600多种遗传疾病与基因有关。妊娠早期用DNA芯片做基因诊断，可以避免许多遗传疾病的发生疾病诊断由于大部分疾病与基因有关，且与多基因有关，利用DNA芯片可对一些疾病进行诊断器官移植可用于HLA分型病原体诊断细菌和病毒鉴定、耐药基因的鉴定环境的影响花粉过敏等人体对环境的反应都与基因有关法医学DNA芯片较DNA指纹鉴定更有优点基因芯片在医学领域中的应用三、基因诊断的常用技术配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）四、基因诊断在临床医学中的应用（一）遗传性疾病的基因诊断镰刀状红细胞贫血、血友病、地中海贫血、脆性X综合征等均可应用分子生物学技术对其进行基因诊断。配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）四、基因诊断在临床医学中的应用（二）感染性疾病的基因诊断可检出的病原体有：乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人乳头瘤病毒、柯萨奇病毒、EB病毒、疱疹病毒、结核分枝杆菌、产毒性大肠杆菌、奈瑟淋球菌、肺炎支原体、疟原虫、利什曼原虫、白色念珠菌等。配套题库请下载医学猫APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。诊断学（第9版）（三）肿瘤的基因诊断1.癌基因：指能参与或直接导致细胞发生恶性转化的基因。（1）肿瘤非特异性癌基因如H-ras、K-ras、c-myc等基因。（2）瘤特异性癌基因如c属于非特异性癌基因；c-sis与淋巴结肿瘤转移有关，c-abl与慢性髓系白血病有关。2.原癌基因：指存在于正常细胞内，在一定的因素刺激下可转变为癌基因的基因序列。3.抑癌基因：是一类抑制细胞过度生长、增殖从而遏制肿瘤