实验活动生物危害评估报告

实验活动生物危害评估报告为保证实验室工作人员在工作中不被危害性生物及物品所侵害，保证危害性物品不外泄，对实验室工作环境进行评估，以鉴定生物安全防护等级，保证生物安全。一、危害程度分类及生物安全防护水平评估本实验室是为医院科研工作提供公共科研平台。生物源危害主要是由临床取材标本（如血液、组织等）中的微生物，尤其是病原微生物引起的，包括细菌、病毒、寄生虫等，具有潜在危险性，可能引起实验室感染；此外，实验室还存在触电、火灾、化学腐蚀、偷盗等危险。根据《实验室生物安全通用要求》，本实验室不涉及《人间传染的病原微生物名录》中高致病性微生物的分离培养及高致病性微生物的菌、毒种的保藏，实验室采用一定防护措施就能控制感染或防范灾害，或者对相应病原体存在有效的免疫方法。评估我实验室生物安全防护水平按二级实验室（BSL-2）生物安全要求。二、实验室工作人员和实验室安全防护的一般要求1.吸烟危害评估及防护（1）实验室工作区内绝对禁止吸烟；（2）点燃的香烟是易燃液体的潜在火种2.实验区内食用食物、饮料及其他危害评估及防护（1）实验室工作区内不得有食物、饮料及存在“手-口”接触可能的其他物质；（2）实验室工作区内的冰箱禁止存放食物，专用存放食物的冰箱应放置在允许进食、喝水的休息区内。3.使用化妆品危害评估及防护实验工作区内禁止使用化妆品进行化妆，但允许并建议经常洗手的实验人员使用护手霜。4.实验中眼睛和面部的风险评估及防护（1）处理腐蚀性或毒性物质时，需使用护目镜、面罩或其他保护眼睛和面部的防护用品；（2）工作人员在实验室的危险区内不要佩戴隐形眼镜，除非同时使用护目镜或面罩；（3）使用、处理能通过粘膜或皮肤感染的试剂，或有可能发生试剂溅溢的情况时，必须佩带护目镜、面罩。5.实验中服装和个人防护装备的一般要求（1）应穿着符合实验室工作需要的服装，工作服应干净、整洁；当工作中有危险喷溅到身上的可能时，应使用一次性塑料围裙或防渗外罩；有时还需要佩戴其他防护装备，如：手套、护目镜、面罩等；（2）个人防护服应定期更换以保持清洁，遇被危险物品严重污染，则应立即更换；（3）不得在实验室内设置值班床，严禁在实验室内住宿。6.实验中足部防护的一般要求在工作区，应穿舒适、防滑、并能保护整个脚面的鞋；在有可能发生液体溅溢的工作岗位，可加套一次性防渗漏鞋套；帆布鞋可吸收化学物品和有传染性的液体，最好穿皮革或其他防渗漏的合成材料鞋。7.实验中头发和饰物的风险评估及防护留长发的工作人员应将头发盘在脑后，以防止头发接触到被污染物，并避免人体脱屑落入工作区；头发不得垂肩，应与离心机、切片机等正在运转的机械保持一定距离。8.实验中胡须的风险评估及防护蓄有胡须的男性工作人员必须遵守上项（7）规定。9.洗手的要求实验室工作人员在脱下手套后、离开实验室前、接触患者前后、以及在进食前都应该洗手；接触血液、体液或其他污染物时，应立即洗手。10.锐利物品的危害评估及防护谨慎处理针头、解剖刀和碎玻璃等锐利物品；使用后的针具不要折断、弯曲、破损、重复使用或用手重装在针管上。一次性注射器上的针头、枪头等锐利物品用后应立即取下放置在专用锐器盒内，在完全装满之前或48小时之内统一进行无害化处理。11.工作环境的要求（1）“清洁”区和“非清洁”区根据实验室的具体工作情况由主任选择并确定“清洁”和“非清洁”工作区，在清洁区和非清洁区之间设“缓冲室”。被指定为“清洁”的区域，则应努力保持清洁，如采取预防措施，防止电话、视频显示器终端、键盘、门柄及其他经常被手或手上的手套触摸的物品的污染，要求工作人员在触摸设备（如计算机键盘及电话的保护罩等）前取下手套，制定仪器设备和工作面的常规消毒和清洁制度和对严重污染的紧急处理措施办法。被指定为“非清洁”的区域，允许戴手套接触所有物品（如电话、门柄、计算机终端和其他物品）所有这些物品的表面都认为是不清洁的。未戴手套的人员如果使用该区域内的电话、计算机终端或其他设备，应戴上手套，或在使用后立即彻底洗手。“清洁”和“非清洁”区都应保持整洁，实验台至少应每天清洁、消毒一次，如有必要可以多次清洗、消毒。在处理溅溢的样品和严重污染的工作台面时，应戴上手套和其他个人防护装备、使用相应合适的清洁剂清除所有的溅溢物。（2）冰箱、冰柜、水浴锅和离心机应定期清洗和消毒（时间由实验室主任来决定），在发生严重污染后应立即进行清洗和消毒；进行清洗和消毒时应戴上手套，穿上工作服或其他合适的防护服。（3）外衣：外衣（实验服、工作服）应悬挂在远离散热器、蒸汽管道、供暖装置以及有明火的地方，不要挂在压缩气瓶或灭火器上，也不要挂在门的玻璃隔板上，妨碍视线。“清洁”和“非清洁”的个人防护服要分开存放。（4）垃圾处理：每天至少清理垃圾1--2次。（5）装饰：不得在电灯、灯座或仪器上进行装饰，更不要使用电子装饰物、蜡烛、圣诞树等有引起火灾危害的装饰品。（6）为便于清洁消毒，实验室内不得有织物装饰的用具或椅子。（7）个人物品：实验工作区不得存放个人物品，如钱包、手套、皮靴、咖啡杯、运动服、预包装的食品和药品等。（8）实验室内应配备应急设备，如应急洗眼装备，酒精等消毒用品。（9）实验室应安装非手触式洗手装置。（10）实验室内应安装防蚊蝇装置，应定期投撒灭蟑螂老鼠的药物。（11）用后的废弃物品：实验工作区内的用后废弃物品存量不要太大；具有危险性的液体如酸或碱性液体应专人保管，放在视平线以下；较大的废弃物容器应靠近地面角落存放。（12）出口通路：实验室的出口和通道必须保持畅通无阻，不准堆放物品、垃圾、装置或设备。安全门必须保持畅通，不得堵塞。注意：无论任何时间、何种原因都不得阻塞通往灭火器、火警箱、防火沙、安全淋浴或出口的通道。12.使用玻璃器具的危害评估及防护操作玻璃器具时应遵循以下安全原则：不要使用破裂或有缺口的玻璃器具不要用猛力取下玻璃试管上的塞子，粘紧的试管可用刀切开分离，接触过传染性物的玻璃器具，清洗之前应先行消毒；破裂的玻璃器具和玻璃碎片应丢弃在有专门标记的、单独的、不易刺破的容器里；高热操作玻璃器具时应戴隔热手套；在不影响试验质量的前提下，应尽量减少使用玻璃器具。13.使用离心机的危害评估及防护感染途径危害评估感染途径危害评估感染途径危害评估皮肤极少粘膜（眼结膜）可能呼吸道可能消化道（经手-口）极少经血（针刺伤、切割伤）极少经血（虫媒介）极少（1）气溶胶：离心过程中应控制气溶胶的产生在最低水平。（2）操作：离心机只有在盖好盖板后，才能启动。（3）传染性物品：所有能够产生气溶胶进行播散的生物制品或标本，均应使用密封的离心管，并在盖紧的离心头或转头中进行。（4）为防止气溶胶飞溢，应在离心停止30分钟后打开离心物。（5）清洗：按照消毒隔离制度要求清洗离心机。（6）平衡：离心时应保持合适的平衡，以保证离心的顺利进行。14．采集血样的危害评估及防护感染途径危害评估感染途径危害评估感染途径危害评估皮肤极少粘膜（眼结膜）极少呼吸道可能消化道（经手-口）极少经血（针刺伤、切割伤）可能经血（虫媒介）极少刀切可能化学腐蚀极少放射无（1）每天早晨用500mg/L的“84”消毒液擦拭抽血台面及其它物表，并开紫外灯消毒至少30分钟，做好记录。（2）工人每天早晨更换消毒液，包括浸泡锐器、止血带的消毒液和手消毒液。（3）工作人员必须穿工作服，戴好口罩、帽子、和手套。（4）使用合格的一次性用品，严禁使用包装破损，过效期的用品。（5）严格执行无菌技术操作规程、静脉采血必须一人一针一管；对每位病人操作前应洗手或手消毒。（6）无菌物品如棉球需每天更换，开启后使用不得超过24小时。（7）工作人员需对锐器如采血针采取高度预防措施，用过的采血针需浸泡在含有消毒液的厚壁容器中，集中进行无害化处理。15.标本(血清、血浆、全血、尿)在检测过程的危害评估及防护感染途径危害评估感染途径危害评估感染途径危害评估皮肤极少粘膜（眼结膜）可能呼吸道可能消化道（经手-口）极少经血（针刺伤、切割伤）极少经血（虫媒介）极少盗窃可能化学腐蚀无放射无（1）每天早晨做好实验室的清洁消毒工作。（2）工作人员要戴口罩、手套进行操作。（3）废弃的标本连同试管、盖帽要用1000mg/L“84”消毒液浸泡，由工人统一清洁后进行无害化处理。（4）实验中使用的吸头、一次性塑料杯用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡，由工人统一清洁后进行无害化处理（5）标本污染物表时，应立即消毒。（6）离心时，发生试管破裂或标本溅出，由操作者负责用有效消毒剂对离心机内部进行及时消毒处置。16．微生物分离鉴定药敏试验及基因扩增试验活动的危害评估及防护感染途径危害评估感染途径危害评估感染途径危害评估皮肤可能粘膜（眼结膜）可能呼吸道可能消化道（经手-口）可能经血（针刺伤、切割伤）可能经血（虫媒介）可能盗窃可能化学腐蚀极少放射无（1）每天早晨开紫外灯消毒空气至少30分钟，同时做好各物表、仪器的清洁消毒工作。（2）实验人员要戴手套、帽子进行操作。当估计会出现微生物和危险物溅出时要戴好眼罩或面罩。（3）操作中使用的接种环、镊子等金属物品要在酒精灯火焰上烧灼灭菌。（4）可能产生致病性微生物气溶胶或出现溅出的操作如涂片、接种时，应在生物安全柜内操作，并使用个体防护设备。（5）实验室内的各种标本、菌种、培养基和其它废弃物在运出实验室前必须灭活（高压、浸泡），需运出实验室灭活的物品必须放在专用的密闭容器中。（6）操作过程中发生菌种污染物表时，应马上进行物表消毒。（7）当发生致病性微生物气溶胶污染时，应马上进行人员疏散，通知相关负责人到现场进行指导消毒。（8）对菌种的保存应严格遵守菌种保存制度，严禁擅自保存各种国家法定传染病菌株或毒株。（9）实验人员离开实验室前要去除手套，确认无污染或污染已排除，后方可洗手离去。（10）微生物、PCR实验室要设置纱窗、挡鼠板。三、特定实验活动危害评估（见以下章节之各种病原体的危害评估）肝炎病毒的危害评估肝炎病毒是引起病毒性肝炎的病原体，目前公认的人类肝炎病毒至少有5种类型，包括甲型、乙型、丙型、丁型及戊型肝炎病毒。甲型肝炎病毒和戊型肝炎病毒主要由消化道传播；乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒主要由血源性传播；丁型肝炎病毒为一种缺陷病毒，必须在嗜肝DNA病毒等辅助下方可复制，故其传播途径与乙型肝炎病毒相同1、肝炎病毒的分类：（1）甲型肝炎病毒（HAV）是一种RNA病毒，属微小核糖核酸病毒科，是直径约27nm的球形颗粒，由32个壳微粒组成对称20面体核衣壳，内含线型单股RNA。HAV具有4个主要多肽，即VP1、VP2、VP3、VP4、其中VP1与VP3为构成病毒壳蛋白的主要抗原多肽，诱生中和抗体。HAV在体外抵抗力较强，在-20℃条件下保存数年，其传染性不变，能耐受56℃30分钟的温度及PH3的酸度。（2）乙型肝炎病毒（HBV）是一种DNA病毒，属嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae），是直径42nm的球形颗粒。又名Dane颗粒，有外壳和核心两部分。外壳厚7-8nm，有表面抗原（HBsAg），核心直径27nm，含有部分双链，部分单链的环状DNA，DNA聚合酶，核心抗原及e抗原。HBVDNA的基因组约含3200个硷基对。长链的长度固定，有一缺口（nick）此处为DAN聚合酶，短链的长度不等。当HVB复制时，内源性DNA聚合酶修补短链，使之成为完整的双链结构，然后进行转录。HBVDNA的长链有4个开放性读框（ORF），即S区、C区、P区和X区。S区包括前S1前S2和S区基因，编码前S1、前S2和S三种外壳蛋白；C区以包括前C区，C区基因编码HBcAg蛋白，前C区编码一个信号肽，在组装和分泌病毒颗粒以及在HBeAg的分泌中起重要作用；P基因编码DNA聚合酶；X基因的产物是X蛋白，其功能尚不清楚。HBVDNA的短链不含开放读框，因此不能编码蛋白。乙型肝炎患者血清在显微镜的观察下可查见3种颗粒：①直径22nm的小球形颗粒；②管状颗粒，长约100～700nm，宽约22nm;③直径为42nm的大球形颗粒。小球形颗粒。小球形颗粒及管状颗粒均为过剩的病毒外壳，含表面抗原，大球形颗粒即病毒颗粒，有实心与