高中生物必修一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定-人教版

【实验一】生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定【实验一】生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定1、可溶性还原糖的鉴定原理：（1）生物组织中普遍存在的可溶性还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖，分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原性糖；（2）用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖的存在与否。斐林试剂由质量浓度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀（3）用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色—棕色—砖红色（沉淀）。【实验原理】2、蛋白质的鉴定原理（1）鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．01g／mL的硫酸铜溶液。在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与铜离子作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。3．脂肪鉴定的原理：苏丹III染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹IV染液遇脂肪的颜色反应为红色。4、淀粉的鉴定：淀粉遇碘变成蓝色。化合物试剂反应颜色注意事项还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖）斐林试剂砖红色沉淀甲、乙液要现混合现用、还要50-65℃水浴加热蛋白质双缩脲试剂紫色无需加热、但A液和B液要分开使用、先加A液、后加B液脂肪苏丹III染液（苏丹IV染液）橘黄色（红色）要用高倍显微镜观察淀粉碘蓝色煮2分钟还原糖的鉴定：【实验步骤】脂肪的鉴定：先用低倍镜观察，后用高倍镜观察染色2-3分钟显微镜下的脂肪颗粒蛋白质的鉴定：观察颜色变化1．实验成功的关键在于实验材料的选择。（1）可溶性还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织（或器官），而且组织的颜色较浅，或近于白色的。经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。（2）脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选用富含脂肪的种子，且徒手切片要成功。（3）蛋白质的鉴定实验，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋白。【实验成功的关键及注意事项】（10．1g/mL的NaOH和乙液（0．05g/mL的CuSO４溶液）分别配制、储存，使用时，再临时配制，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。（2）双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（0．1g/mL的NaOH溶液），造成碱性的反应环境，再加试剂B（0．01g/mL的CuSO４溶液）。（3）在蛋白质的鉴定实验中，若用蛋白质作实验材料，必须稀释，以免实验后粘住试管，不易洗刷。（4）在鉴定脂肪的实验中，若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形，染色时间不宜过长。【注意事项】练习1．用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时，可用来冲洗浮色的药品是（A．HClB．H２ＯC．50%的酒精D．无水酒精2．下列哪个实验用到显微镜（A．可溶性还原糖的鉴定BC．脂肪的鉴定D．淀粉的鉴定3．下列哪组试剂在使用过程中，必须经过加热（AB．苏丹Ⅲ和苏丹ⅣCD4．某人做实验时，用了放置时间很久的蔗糖，结果，此对照试管加入斐林试剂后，也出现了砖红色沉淀，原因是（ABCDCCAC5．对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是（）A．都含有NaOH溶液和CuSO４B．斐林试剂的配制是将4～5滴0．05g/mL的CuSO４溶液滴入2mL0．1g/mL的NaOHC．双缩脲试剂是将3～4滴0．01g/mL的CuSO４溶液滴入2mL0．1g/mL的NaOHD．双缩脲试剂含有两种试剂：质量浓度为0．1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0．01g/mL的CuSO４溶液C6．不同的有机物与某些物质反应有特殊的显色反应，实验中常以此来鉴定不同的有机物，肾小球肾炎病人常伴随水肿，其尿液（）A．与二苯胺反应呈蓝色B．与斐林试剂反应呈砖红色C．与苏丹Ⅲ反应呈橘黄色D．与双缩尿试剂反应呈紫色（2004年2月温州一模理综5题）D7、下列关于实验鉴定糖类、蛋白质和脂肪操作的叙述中，正确的是（）A．鉴定还原性糖的斐林试剂甲液与乙液，可直接用于蛋白质的鉴定B．鉴定脂肪的存在，要用显微镜观察是否有被染成橘黄色或红色的颗粒C．鉴定可溶性还原性糖时，先加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液D．鉴定蛋白质时，双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后再加入含样品的试管中B8、下面是一组探究生物体内主要有机物存在与否的鉴别实验，按表中数字顺序下列各选项表示正确的是（）A．葡萄糖、苏丹Ⅲ、紫色、二苯胺B．蔗糖、苏丹Ⅳ、紫红色、碘液C．还原糖、苏丹Ⅳ、蓝紫色、硫酸铜D．果糖、苏丹Ⅳ、紫色、二苯胺D9、生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是（）A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A37．根据“生物组织中可溶性糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验，回答下列问题：（1）鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖所用的试剂是___________________，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成___________________沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液中___________________的含量。（2）鉴定花生子叶中脂肪的实验中，能将脂肪染成橘黄色的染液是_________________，用其染色时，要用酒精冲洗浮色，这是因为______________________________。（3）鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B的量只有3～4滴，而不能过量，为什么？__________________________________。斐林试剂砖红色葡萄糖苏丹Ⅲ苏丹Ⅲ能溶解在酒精中过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色（4）本实验注意事项：①斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需_________________。使用时再临时混合均匀用于实验。②双缩脲试剂的使用，应先加试剂_________________，造成碱性环境，再加试剂_________________。③在可溶性糖的鉴定中，对试管中溶液加热时，试管底部不要触及______________；试管口不要朝向___________，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。④蛋白质的鉴定的样液浓度不能_________________，以免实验后粘住试管壁，洗不净。分别配制，储存0．1g/mL的NaOH0．01g/mL的CuSO4烧杯底部实验者太大37．（1）斐林试剂砖红色葡萄糖（2）苏丹Ⅲ苏丹Ⅲ能溶解在酒精中（3）过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色（4）①分别配制，储存。/②0．1g/mL的NaOH；0．01g/mL的CuSO4。③烧杯底部；实验者。/④太大。2、据报道，继“阜阳假奶粉案”曝光后，“假牛奶案”逐渐浮出水面。一些不法商家生产的所谓“100%纯牛奶”居然与牛没有任何关系，只要用香精、糖、自来水和一些添加剂，就可以生产出“纯牛奶”。更耸人听闻的是，不法商家利用垃圾堆里的破旧皮鞋、皮衣、皮帽及其他皮具，经过化学、生物处理，水解出皮革中的原有蛋白（称“人造蛋白”），作为原料制成假牛奶。有人分析，“阜阳假奶粉案”所造成的大头娃娃致死，并非单纯是蛋白质含量低那么单纯，很可能是添加了“人造蛋白”所致。请设计实验，探究“人造蛋白”是否比缺乏蛋白质更有害儿童正常发育。（1）实验材料：幼龄大白鼠若干、真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶、发育状况测定装置（可测定一定的发育状况指标）、饲养装置等。（2）实验步骤①_________________________________________________________________________________②_____________________________________________________________________③在相同的且适宜的条件下饲养一段时间。④_____________________________________________________________________（3）预测实验结果，并做出相应的结论。（写出其中2种即可）①_____________________________________________________________________②_____________________________________________________________________选取年龄相当、体重相当、发育良好的大白鼠若干，平均分为三组，标记为A、B、C。分别饲养每天分别给A、B、C三组大白鼠饲喂等量的真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶用发育状况测定装置测定A、B、C三组鼠的发育状况。记录各组发育状况指标，计算出各组的平均值，进行比较分折①A组发育正常，B组和C组均不正常，但B、C两组的发育状况指标差异不显著。说明“人造蛋白”并不比缺乏蛋白质对儿童正常发育更有害②A组发育正常，B组和C组不正常，但B组比C组发育状况指标好，差异显著。说明“人造蛋白”比缺乏蛋白质对儿童正常发育更有害（注：其他的合理答案均可）参考答案：2．（2）①选取年龄相当、体重相当、发育良好的大白鼠若干，平均分为三组，标记为A、B、C。分别饲养②每天分别给A、B、C三组大白鼠饲喂等量的真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶④用发育状况测定装置测定A、B、C三组鼠的发育状况。记录各组发育状况指标，计算出各组的平均值，进行比较分折（3）①A组发育正常，B组和C组均不正常，但B、C两组的发育状况指标差异不显著。说明“人造蛋白”并不比缺乏蛋白质对儿童正常发育更有害②A组发育正常，B组和C组不正常，但B组比C组发育状况指标好，差异显著。说明“人造蛋白”比缺乏蛋白质对儿童正常发育更有害（注：其他的合理答案均可）3。蛋清的主要成分是蛋白质，在碱性的溶液中，蛋白质与CuSO4反应能产生紫色物质，这是蛋白质的双缩脲反应。请根据这一反应特征，利用下列材料，设计一个实验来证明人的唾液中含有蛋白质。实验材料：5%的NaOH溶液、3%的CuSO4溶液、水、试管、滴管、脱脂棉球、镊子和小烧杯。实验步骤：（1）收集唾液________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________（2）__________________________________________________（3）_______________________________________________（4）结果观察：_________________________________用清水将口漱净，口含一块脱脂棉；片刻用镊子取出，并将其中的唾液挤入试管（或用凉开水漱口后，略微张开口，舌尖抵在下颌门齿的下方，约3分钟，将下唇搁在另一小烧杯口上，唾液就就沿下唇流入烧杯中。）用滴管向试管中滴加2—3滴5%的NaOH溶液，振荡。用滴管向试管中滴加2—3滴3%的CuSO4溶液，振荡静置一会儿后，观察到红紫色，说明唾液中含有蛋白质验证生物组织中的可溶