家兔颈部动脉和神经的分离及减压神经放电的引导实验报告

中央民族大学生命与环境科学学院生理学实验报告2011年10月28日家兔颈部动脉和神经的分离及减压神经放电的引导和家兔动脉血压的神经与体液调节-1-【目的与要求】1.学习家兔颈部手术与分离主动脉神经的方法。2.学习在体神经冲动引导与记录的方法，理解主动脉神经的生理功能。3.掌握记录和测量家兔动脉血压的直接测量方法。4.观察神经和体液因素改变对家兔动脉血压调节的影响，并分析该些因素的作用机制。【实验原理】主动脉神经是主动脉弓压力感受器的传入神经，又称减压神经。神经传入冲动的频率，在一定范围内随主动脉血压的升高或降低而相应增加或减少，从而使压力感受性反射增强或减弱，以维持动脉血压的相对稳定。由于家兔主动脉神经独成一束，易于分离，故常用家兔为实验动物，进行主动脉神经冲动的引导与血压实验。在正常的生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦-主动脉弓压力感受器反射尤为重要。此反射即可使升高的血压下降，又可使降低的血压升高，故有血压缓冲反射之称谓。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支，易于分离与观察其作用。【实验动物及器材】家兔、兔手术台，常用手术器械，止血钳、眼科剪、支架、气管插管、Pc-Lab生物信号采集系统、保护电极、纱布、棉球、丝线、20ml注射器、20%-25%氨基甲酸乙酯，肝素，去甲肾上腺素，生理盐水；RM6240生物信号采集系统，手术剪1把，眼科剪1把，止血钳，镊子，电刺激连线，兔手术台，注射器及针头，血管插管，动脉夹，血压换能器，铁架台，婴儿秤，输液装置，照明灯，有色丝线；【实验步骤】1、实验动物准备1）麻醉：取家兔一只称重，按4-5ml/Kg(1g/Kg)耳缘静脉注射20%-25%氨基甲酸乙酯进行麻醉。2）固定剪毛：背位固定在兔手术台上，剪去颈部手术视野中的被毛。3）手术分离血管与神经A、颈部皮肤切口5-7cm，分离皮下组织B、分离肌肉层：钝性分离-2-C、行气管插管：倒“T”切口，插管固定D、分离血管与神经：一侧：迷走神经(1)、主动脉神经（2）、颈动脉（1）另一侧：迷走神经(1)、颈动脉(3)（插管用）2、连接仪器引导减压神经放电活动打开Pc-Lab生物信号采集系统，连接引导电极在第一通道中，设置通道功能为神经放电，输入实验相关信息，采样观察减压神经放电活动。3、实验装置与连接：①将压力换能器固定于铁支架上，使换能器的位置尽量与实验动物的心脏在同一水平面上。然后将换能器输入至RM6240生物信号采集系统一通道。②压力换能器的另一端与三通管相连。三通管的一个接头将与动脉插管相连。在将动脉插管插入左颈总动脉前，先用盛有肝素的注射器与三通管另一接头相连，旋动三通管上的开关，使动脉插管与注射器相通，推动注射器，排空动脉插管中的气体，使动脉插管内充满肝素溶液，然后关闭三通管。4、仪器调试：在“实验”菜单中选择“循环——兔动脉血压调节”。双击一通道，调节增益、采样参数，使基线归零，令图形位于屏幕中央，便于观察。5、动脉插管：在左颈总动脉的近心端夹一动脉夹，然后结扎其远心端(保留此结扎线头)，在动脉夹与结扎之间一般应相距2cm以上。在结扎端的下方用眼科剪作一斜口，向心脏方向插入动脉插管，用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处(注意此处务必扎紧)，并以远心端丝线将插管缚紧固定，以防插管从插入处滑出。6、静脉插管：用一丝线将右侧颈外静脉远心端提起，用眼科剪在其下方做一斜口，向心脏方向插入静脉插管，用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处，并以远心端丝线将插管缚紧固定，结扎血管同时防插管从插入处滑出，静脉插管成功后立即开始输液，并将输液速度调慢。7、记录血压：一切准备完毕，移去动脉夹，启动记录按钮，开始记录血压曲线。8、实验观察：（1）记录正常血压曲线。（2）用血管夹夹闭右侧颈总动脉20s，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。（3）静脉注射去甲肾上腺素：从右侧颈外静脉注射0.3ml去甲肾上腺素，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。（4）刺激主动脉神经,：以5V，频率25Hz，持续10s的定时刺激刺激右侧主动脉神经，观-3-察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。（5）刺激迷走神经：以1V，频率25Hz，持续10s的定时刺激刺激右侧迷走神经，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。【实验结果】1.夹闭一侧颈总动脉血压变化：2.按压颈动脉窦是血压变化：-4-3.刺激迷走神经：4.刺激迷走神经中枢端：-5-5.刺激迷走神经外周端：6.刺激减压神经：-6-7.刺激减压神经外周端：8.刺激减压神经中枢端：-7-9.注射肾上腺素：10.注射乙酰胆碱：【分析讨论】1.夹闭一侧颈总动脉15s后，观察到兔动脉血压升高的现象：这是由于颈动脉窦管壁的外膜下分布有丰富的感觉神经末梢，是动脉张力感受器。这个感受器位于兔颈总动脉的远心端，颈内动脉与颈外动脉的分叉交界处。夹闭颈动脉后，远心-8-端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降，传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱，心交感和心缩血管紧张加强，作用于心脏，使心率加快，心输出量增加，血管收缩，血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。若血压下降过大，交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统，是静脉收缩，促进血液回心，使每博输出量增加。2.刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降，而刺激该神经外周端基本不变：兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化。3.刺激迷走神经后观察到，刺激迷走神经和迷走神经外周端都能引起明显的减压反应，而刺激迷走中枢端则没有减压反应，只是稍有轻微抬升变化：迷走神经中含从延髓下行的传出纤维，通向心脏。节前纤维末端释放Ach,节后纤维末端释放Ach,属于副交感神经纤维，能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。从而使心输出量变小，平均动脉压降低。此外，还有主动脉体化学感受器的上行纤维在迷走神经中并行，化学感受器受刺激的效应是血压升高。所以，刺激迷走中枢不能引起减压反应，却可以使血压轻微抬高。此外，若切断两侧迷走神经，迷走紧张消失，迷走吸气兴奋反射通路也断了，动物的吸气变深，周期变长，二级曲线周期性变得不明显。4.加入0.2ml0.01%去甲肾上腺素后，观察到平均动脉压抬高。这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的α和β2甲肾上腺素能受体结合，使血管收缩，管径变小，外周阻力增加，从而使平均动脉压升高。此外，去甲肾上腺素还可以使心率增加，心收缩力变大。只是缩血管效应更明显。5.加入0.2ml0.01%乙酰胆碱后，观察到一级曲线周期变慢，平均动脉压下降。Ach能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。心率变慢则流向外周的血量变多，舒张压更低。心房收缩力减弱则收缩压也有下降。平均动脉压降低。但是因为血回心时间变长，因此，回心血量较多，脉压增加。而大多数血管没有Ach受体，Ach对外周阻力影响不大。【结论】夹闭一侧颈总动脉——家兔的血压上升。-9-按压颈动脉窦——血压急速降低。刺激迷走神经——血压降低迅速且明显。刺激迷走神经中枢端——血压降低迅速且明显。刺激迷走神经外周端——血压降低幅度较小。刺激减压神经——血压有所下降。刺激减压神经外周端——血压基本没变化。刺激减压神经中枢端——血压有些许降低。注射肾上腺素——血压升高。注射乙酰胆碱——血压没多大变化。