螺旋体(大专)

第十四章螺旋体(spirochete)•spirochete是一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。•基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等螺旋体的科和属螺旋体引起人类疾病病原体螺旋体科脊膜螺旋体属(Cristispira)不－蛇形螺旋体属(Serpulina)不－螺旋体属(Spirochaeta)不－密螺旋体属(Treponema)梅毒苍白密螺旋体苍白亚种地方性梅毒苍白密螺旋体地方亚种雅司苍白密螺旋体极细亚种品他病品他密螺旋体疏螺旋体属(Borrelia)流行性回归热回归热疏螺旋体地方性回归热许多种莱姆病伯氏疏螺旋体，伽氏疏螺旋体，埃氏疏螺旋体钩端螺旋体科细丝体属(Leptonema)不－钩端螺旋体属(Leptospira)钩端螺旋体病问号状钩端螺旋体名称螺旋数螺旋其他特点举例疏螺旋体3-10不规则回归热疏螺旋体伯氏疏螺旋体密螺旋体8-14规则，细密两端尖苍白密螺旋体苍白亚种钩端螺旋体规则，更细密两端钩状问号状钩端螺旋体重要的螺旋体黄疸出血热群钩端螺旋体第一节钩端螺旋体属•螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状。运动活泼,常使菌体呈C、S或8字型•革兰染色阴性，不易着染•Fontana镀银染色法→染成棕褐色1.形态与染色一、生物学性状钩端螺旋体•营养要求复杂，常用Korthof培养基。•适宜生长温度为28~30℃，若11~13℃能生长的为非致病的双曲钩端螺旋体。最适pH7.2~7.6，pH6.5死亡，最高能耐pH8.4。•钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢。•需氧或微需氧。2.培养3.抵抗力•弱。•热抵抗力弱，60℃1min即死亡。•0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经10~30min被杀灭。•对青霉素敏感。•在湿土或水中可存活数月。一、生物学性状4.分类•根据群特异性抗原和型特异性抗原,将钩端螺旋体属进行血清群和血清型的分类。•问号状钩端螺旋体至少可分为25个血清群、273个血清型，其中有我国学者发现的37个血清型。•我国已发现的致病性钩端螺旋体至少有19个血清群、74个血清型，是发现血清型最多的国家。抗原分类DNA分类•问号状钩端螺旋体分为7个基因种二、致病性与免疫性•致病物质---类似细菌内毒素与外毒素•1．内毒素样物质(ELS)或称脂多糖样物质(LLS)细胞壁中含有的类似脂多糖物质。引起的病理变化与典型的内毒素相似，只是活性较低。•2．溶血素波摩那型、犬型、七日热型产生溶血素，破坏红细胞膜而溶血。注射入小羊，可出现贫血、出血、肝肿大、黄疸和血尿。溶血素不耐热，56℃经30分钟失活。对氧稳定，可被胰蛋白酶破坏。有认为溶血素的本质是鞘磷酶C。3．细胞毒性因子(CTF)患者急性期血浆中存在，将之注射小鼠，可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。症状与钩端螺旋体接种至金地鼠临死前的症状相同。钩端螺旋体无毒株不产生CTF。4.细胞致病作用(CPE)物质56℃经30分钟被破坏。注射入家兔，可形成红斑和水肿。二、致病性与免疫性•所致疾病钩端螺旋体病------一种人畜共患传染病•储存宿主•传播途径鼠和猪人与污染水或土壤接触,经粘膜或破损皮肤进入;经胎盘垂直传播•临床表现进入损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经，可出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等。先形成钩体血症•疾病特点起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大•免疫性疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力，细胞免疫为主三、微生物学检查法1.病原体检测发病10天内取血液;1周后取尿液;有脑膜刺激者取脑脊液•直接镜检•分离与鉴定接种至Korthof培养基，置28℃孵育。阳性标本在2周内可见培养液呈轻度混浊→暗视野显微镜检查→有→则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者。•动物接种敏感方法，尤适于有杂菌污染的标本。将标本接种于幼龄豚鼠或金地鼠腹腔,3~5d后，用暗视野显微镜检查腹腔液；或3~6d取心血检查并作分离培养。•分子生物学方法2.血清学诊断•病初和发病后第3~4周各采血清一次。有脑膜刺激症状者采取脑脊液•方法:显微镜凝集试验(MAT)间接凝集试验以乳胶(聚苯乙烯)或活性炭微粒为载体，吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物•MAT抗体效价1:300，炭粒凝集效价1:8、乳胶凝集效价1:2，可判为阳性。但若第2次采血测定效价呈4倍或以上增长者，临床意义更大。四、防治原则•防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。•在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。第二节梅毒螺旋体•生物学性状:•致病性与免疫性:•微生物学检查法:•防治原则:•8~14个致密而规则的小螺旋，两端尖直，运动活泼•革兰染色阴性，不易着染•Fontana镀银染色法→染成棕褐色1.形态与染色一、生物学性状•不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖•在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢，约30h才分裂一次。•含3%~4%氧时生长最宜。一、生物学性状2.培养3.抵抗力•极弱。•对温度和干燥特别敏感。41.5℃经1h死亡，在50℃时5min死亡；在血液中，4℃置3d后可死亡。离体后1~2h将死亡。•对常用化学消毒剂亦敏感，1%~2%石炭酸内数分钟就死亡。•对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感。二、致病性与免疫性•致病物质外膜蛋白---与宿主细胞粘附透明质酸酶---利于扩散宿主细胞纤维粘连蛋白覆于表面-免受宿主免疫细胞攻击•所致疾病---梅毒人是梅毒的唯一传染源，有先天性和获得性两种。获得性性接触传播先天性母体→胎盘→胎儿•免疫性•感染性免疫•细胞免疫比体液免疫重要获得性梅毒Ⅰ期（初期）梅毒：感染性极强，破坏性小感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般4~8周后，常自愈。渗出液中有大量苍白亚种螺旋体。Ⅱ期梅毒：感染性强，破坏性小发生于硬下疳出现后2~8周。苍白亚种螺旋体血症，全身皮肤、粘膜常有梅毒疹（扁平湿疣），全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器。在梅毒疹和淋巴结中，存在有大量苍白亚种螺旋体。Ⅲ期(晚期)梅毒：感染性小，破坏性大发生于感染2年以后，亦可长达10~15年的。病变可波及全身组织和器官。基本损害为慢性肉芽肿，局部因动脉内膜炎所引起的缺血而使组织坏死。Ⅲ期梅毒损害也常进展和消退交替出现。皮肤、肝、脾和骨骼常被累及。若侵害中枢神经系统和心血管，可危及生命。Ⅰ期（初期）梅毒Ⅱ期梅毒Ⅱ期梅毒Ⅲ期(晚期)梅毒先天性梅毒（胎传梅毒）•多发生于妊娠4个月之后。•苍白亚种螺旋体经胎盘进入胎儿血流，并扩散至肝、脾、肾上腺等大量繁殖，引起胎儿的全身性感染，导致流产、早产或死胎；•出生梅毒儿，呈现马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、先天性耳聋等特殊体征。三、微生物学检查法1.标本•Ⅰ期梅毒----硬下疳渗出液•Ⅱ期梅毒----梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液2.显微镜检查3.血清学诊断•非密螺旋体抗原试验：抗原(正常牛心肌的心脂质)→血清中的反应素(抗脂质抗体)方法:VDRL和RPR试验。适用于大量过筛•密螺旋体抗原试验：抗原（Nichols株螺旋体）→螺旋体特异抗体优点：特异性强，可用作梅毒证实试验常用方法：的有FTA-ABS试验和MHA-TP试验四、防治原则•加强性卫生教育和严格社会管理。•梅毒确诊后，宜用青霉素等药物及早予以彻底治疗第三节疏螺旋体属伯氏疏螺旋体(B.burgdorferi)伯氏疏螺旋体是莱姆病（Lyme）的病原体。形态：疏螺旋体，两端稍尖，运动活泼染色：革兰阴性，不易着染培养：营养要求高生物学性状致病性与免疫性莱姆病是一种自然疫源性传染病。储存宿主主要是野生和驯养的哺乳动物。白足鼠，鹿主要传播媒介是硬蜱，也可能有其他吸血昆虫参与媒介。•致病物质有粘附素等侵袭力和内毒素。•所致疾病•免疫性莱姆病•经3~30d潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑(ECM)。开始时为红色斑疹或丘疹，随后逐渐扩大形成一片大的圆形皮损，外缘有鲜红边界，中央呈退行性变，故似一红环；也可在皮损内形成几圈新的环状红圈•晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常免疫性•能激发巨噬细胞等使之产生IL-1、IL-6和TNF等细胞因子；亦能活化补体替代途径，促使炎症的发生，既造成机体的损伤，但亦有对宿主有益的免疫防御作用。•伯氏疏螺旋体的抗原性比较稳定，在体内形成的特异性抗体是清除它们的主要免疫机制。回归热疏螺旋体（B.recurrentis)•回归热是由多种疏螺旋体引起的急性传染病。其临床特点为急起急退的高热，全身肌肉酸痛，1次或多次复发，肝、脾肿大，重症可出现黄疸和出血倾向•回归热疏螺旋体引起虱传回归热(流行性回归热)奋森疏螺旋体(B.vincentii)•与梭形梭杆菌寄居于人类口腔牙龈部。当机体免疫功能下降，则这两种菌大量繁殖，协同引起奋森咽峡炎、牙龈炎、口腔坏疽等。