ACTH和CORTISOL的临床应用及其标本的收集处理

ACTH&Cortisol临床应用及其样本的收集处理促肾上腺皮质激素&皮质醇DennyDong;Apr29,2010Insulin胰岛素C-peptideC肽Cortisol皮质醇ACTH促肾上腺皮质激素HCG人绒毛膜促性腺激素FSH促卵泡生成激素LH促黄体生成激素Estradiol雌二醇Progesterone孕酮Prolactin泌乳素Testosterone睾酮DHEA-S硫酸脱氢雄甾酮SHBG性激素结合球蛋白Elecsys可测的部分激素类项目下丘脑肾上腺+－－束状带分泌－糖皮质激素网状带分泌－性激素球状带分泌－盐皮质激素ACTH的生理分泌图解腺垂体+ACTH促肾上腺皮质激素CRH促肾上腺皮质激素释放激素促肾上腺皮质激素（ACTH）简介下丘脑分泌CRH（促肾上腺皮质激素释放激素）作用于垂体前叶的腺垂体垂体分泌ACTH（促肾上腺皮质激素）作用于肾上腺皮质肾上腺皮质由球状带，束状带和网状带构成球状带分泌－盐皮质激素－醛固酮和脱氧皮质酮束状带分泌－糖皮质激素－皮质醇（Cortisol）和皮质酮网状带分泌－性激素－DHEA和雄烯二酮（Andro）以上三类激素都是胆固醇的衍生物肾上腺皮质激素－－主要是糖皮质激素糖皮质激素（GC）－调节糖、蛋白质、脂肪代谢。GC是体内主要的应急激素之一，任何应急状态都可使GC大量释放。主要的GC－皮质醇的分泌能释放氨基酸（来自肌肉）、葡萄糖（来自肝脏）以及脂肪酸（来自脂肪组织），这些被输送到血液里充当能量使用盐皮质激素－促进肾脏保钠排钾，维持机体水和电解质平衡。性激素－肾上腺可少量合成。肾上腺皮质激素（ACH）简介ACTH的临床应用ACTH增高见于①原发性肾上腺功能不全（Addison病）、ACTH不敏感综合征及ACTH受体异常。②垂体瘤引起的继发性库欣病（Cushing病）。③双侧肾上腺皮质增生（Nelson综合征）、脑垂体原发或继发性ACTH腺瘤。④异位ACTH分泌综合征、肺癌、神经性畏食、妊娠、应激状态。ACTH降低见于①下丘脑垂体功能减退、垂体卒中。②手术切除垂体、垂体柄切除术、垂体ACTH肿瘤。③原发性库欣病、肾上腺皮质肿瘤，应用大剂量皮质激素。④继发于垂体功能减低的肾上腺皮质功能减退症（Simmonds-Sheehan综合征）。肾上腺皮质功能紊乱诊断的首选项目是血浆(清)总皮质醇、唾液及尿游离皮质醇测定。若能同肘检测血浆ACTH及进行必要的动态功能试验，则有助于病变部位及性质判断昼夜节律环境→中枢神经系统（CNS）→下丘脑→垂体→靶腺：激素的血浓度存在昼夜节律性波动皮质醇和ACTH在血中的含量呈昼夜周期性变化：在清晨含量达到最高峰，随后逐渐下降，到夜间降到最低点。因此，在分析结果时应了解采血时间。一般选择早上8点、下午4点、凌晨12点3个采血时间ACTH&Cortisol激素分泌的节律性ATCH的分泌会影响到肾上腺皮质分泌的糖皮质激素（皮质醇）的分泌。同时皮质醇的分泌也会反过来调节下丘脑和腺垂体的功能，而负反馈的调节ACTH的分泌。临床上可以通过检测皮质醇与ATCH的变化，并将两者结合起来进行相关疾病的鉴别诊断。疾病皮质醇ACTH继发性库欣氏病（垂体瘤）高高肾上腺瘤高低异位ACTH（垂体以外的肿瘤引起，通常是肺部肿瘤）高高阿狄森病（慢性肾上腺皮质机能减退症）低高垂体机能减退低低肾上腺增生高低Cortisol与ATCH的联合检测肾上腺皮质功能亢进和减退症的鉴别疾病血浆皮质醇血浆ACTHACTH兴奋试验肾上腺皮质功能亢进症下丘脑垂体性肾上腺皮质腺瘤肾上腺皮质腺癌异源ACTH综合征肾上腺皮质功能减退症原发性继发性↑↑↑↑↑↑↑↑↓↓↑↓↓↑↑↑↑↓强反应无或弱反应无反应多无反应无反应延迟反应肾上腺皮质功能亢进的临床表现•临床表现包括满月脸，多血质。有向心性肥胖，突出的锁骨上窝和背颈部脂肪垫(水牛背)；肢体远端和手指常常甚细长，肌肉消瘦无力。皮肤菲薄，萎缩，伤口不易愈合，易擦伤。腹部可见紫纹。高血压，肾结石，骨质疏松，糖耐量减退，对感染抵抗力差和精神障碍常见。停止线性生长是儿童特征。女性常有月经不规则。肾上腺肿瘤，除皮质醇外，雄激素产生增加可导致多毛，颞部脱发和女性其他雄性化体征。肾上腺皮质功能减退的临床表现•A、全身症状。乏力是本病早期出现的重要症状。B、胃肠功能紊乱。C、电解质紊乱。D、心血管症状。E、糖代谢紊乱。G、其他。可有头晕、嗜睡、表情淡漠、精神不振、记忆力减退等神经系统症状。ACTH样本采集注意事项•ACTH极不稳定，放置室温易受蛋白酶降解•只能使用K3-EDTA抗凝的血浆•样本管需要预冷处理。.•样本准备好后，需要立即将样本放入冰块中冷藏运送。•使用冷冻离心机离心样本。•样本需要及时检测，室温下可稳定2小时；或者－20度冷冻保存，可保存4周，冻融一次。•不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。EDTA抗凝，立即分离血浆，全程冷藏，及时检测Cortisol血清样本采集注意事项•血清：按标准常规方法采集。•血浆：肝素、EDTA或枸橼酸钠抗凝均可。其中用枸橼酸钠抗凝的血浆，测定结果需+10%。•标本在2－8度可稳定5天，－20度可稳定3个月。只能冻融一次。•含沉淀的标本使用前需离心。•不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。•注意：由于皮质醇在血中的含量呈现昼夜的周期性变化，应注明采血时间。24小时尿液皮质醇标本预处理具体步骤如下：1.将24小时尿液放置于清洁容器（禁用防腐剂），记录总尿量。如需要须离心处理。2.取600μl尿液和3ml二氯甲烷(CH2Cl2)放入清洁试管充分混匀7分钟。（注：二氯甲烷具有广谱的溶解力、低沸点以及相对而言最低的毒性和相对而言最好的反应惰性，是有机合成中使用频率最高的有机溶剂。作为溶剂其地位几乎跟无机盐化学中水相当。）3.2500g（RCF）离心5分钟，提取二氯甲烷层。吸取1.5ml二氯甲烷层至清洁试管，在缓慢的氮气流（使用氮气吹扫仪）中将其风干。4.在试管中加入300μl通用稀释液置于15~25度温育30分钟，需偶尔搅拌。5.将处理后标本当做血清，血浆标本进行分析.•计算：24小时尿液游离皮质醇nmol/24h＝仪器检测结果×2×尿液总量(L)用有机溶剂溶解Cortisol,氮气流风干，加入稀释液检测Cotisol唾液标本的收集和处理•使用唾液收集管来收集唾液样本.，不要使用有枸橼酸的样本管•被采集者需先咀嚼2min，将棉拭子放入口腔并让唾液完全浸润，然后将棉拭子放到唾液收集管中。•1000g（RCF）离心唾液收集管2min，将唾液从收集管的外管中分离出来。.Use•取内管中的上清液进行实验检测•将处理后标本当做血清，血浆标本进行分析.•离心后的唾液标本2-8°C可稳定5天，•－20°C可稳定3个月.只能冻融一次ACTH&Cotrisol的参考范围Cortisol（血清/血浆）（换算系数nmol/Lx0.3625=μg/L）•上午时间7-10a.m.:171-536nmol/l(6.2-19.4μg/dl)•下午时间4-8p.m.:64-340nmol/l(2.3-12.3μg/dl)24小时尿液100-379nmol/24h(36-137μg/24h)唾液上午时间8-10a.m.:19.1nmol/L(0.69μg/dL)下午时间2:30-3:30p.m.:11.9nmol/L(0.43μg/dL)ACTH（血浆）（换算系数pg/mLx0.22020=pmol/L）上午时间7-10a.m.：5-60pg/mL(1.10-13.2pmol/L)ElecsysACTH&Cortisol基本参数ACTHCortisol样本量50uL20µl检测时间18min18min检测原理夹心法夹心法检测用样本K3-EDTA抗凝的血浆血清；唾液；24小时尿液肝素Li-,Na-,NH4+,EDTA－K2,K3;抗凝血浆测定范围1–2000pg/mL（0.22–440pmol/L）0.5–1750nmol/L(0.018-630.4ug/L）检测灵敏度1pg/mL0.5nmol/L试剂盒稳定期2－8度稳定期；12周2－8度稳定期；12周