DNA双向复制

DNA双向复制实验制作：张湘钰，邹颖，苏林晖，刘舒琪DNA双向复制复制起点：每个复制子都含有复制起点，如大肠杆菌复制起点oriC含245bp个碱基对，能够被多亚基的复制起始区结合蛋白识别，启动复制DNA双向复制Cairns的实验—双向复制复制开始时，将大肠杆菌放在含低剂量的[3H]-dT（3H标记的脱氧胸苷）的培养基中培养几分钟；随后将细菌转移到含高剂量的[3H]-dT的培养基中继续培养一段时间；最后，收集细胞，小心地裂解以抽取其中的染色体DNA进行放射自显影。如果是单向复制，自显影图谱上银颗粒的密度应该是一端高、一端低；如果是双向复制，则应该中间是一段低密度的银颗粒，两侧是高密度的银颗粒。(低密度银颗粒意味着这一段DNA属于复制起始区，高密度颗粒代表的是后来合成的)放射自显影•原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量EvidencepointstobidirectionalreplicationCairns证明大肠杆菌DNA双向复制的实验放射自显影图Thankyou